2) сыворотку
3) сухие пятна крови (+)
4) плазму
При неонатальном скрининге на фенилкетонурию используют сухие пятна капиллярной крови на специальной фильтровальной карте. Кровь получают обычно из прокола пятки новорождённого, наносят на標енную область карты и высушивают при комнатной температуре. В лаборатории из диска высушенного образца элюируют компоненты крови и определяют концентрацию фенилаланина, чаще методом тандемной масс-спектрометрии, флуориметрическим или иным валидированным аналитическим методом.
Такой формат образца обеспечивает стандартизированный забор небольшого объёма материала, удобную транспортировку без центрифугирования и хранение при соблюдении требований к температуре, влажности и защите от загрязнения. Биохимической основой скрининга является выявление гиперфенилаланинемии — повышения фенилаланина вследствие нарушения его превращения в тирозин, наиболее часто при дефиците фенилаланингидроксилазы. При расширенном анализе дополнительно оценивают соотношение фенилаланина и тирозина, что повышает специфичность выявления нарушений обмена.
Высокий результат в сухом пятне не является окончательным диагнозом фенилкетонурии. Он требует подтверждающего исследования количественного аминокислотного профиля в плазме или сыворотке, а при необходимости — молекулярно-генетического анализа и исследования обмена тетрагидробиоптерина. Использование сухих пятен крови позволяет провести массовое обследование новорождённых в короткие сроки и своевременно начать диетотерапию до развития необратимого поражения центральной нервной системы.
| Материал или этап | Особенности исследования | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Сухое пятно капиллярной крови | Кровь наносят на фильтровальную карту, высушивают; в лаборатории используют элюат из стандартного диска | Основной материал для массового неонатального скрининга на гиперфенилаланинемию |
| Фенилаланин | Количественно определяется в образце сухой крови | Первичный маркер нарушения обмена фенилаланина; превышение порогового значения формирует положительный результат скрининга |
| Соотношение фенилаланин/тирозин | Рассчитывается при использовании методов, позволяющих одновременно измерять аминокислоты | Помогает отличить патологическую гиперфенилаланинемию от преходящих изменений аминокислотного обмена |
| Плазма или сыворотка | Получаются после лабораторной обработки венозной крови; требуют полноценного забора и, как правило, охлаждённой транспортировки | Применяются для подтверждения диагноза и оценки расширенного профиля аминокислот, а не как стандартный материал массового скрининга |
| Цельная кровь без высушивания | Содержит клеточные элементы и плазму, но менее удобна для централизованного скрининга и транспортировки | Является исходным материалом для формирования сухого пятна, однако не соответствует оптимальному формату скринингового образца |
| Повторное обследование | Проводится при раннем заборе, недоношенности, недостаточном питании, сомнительном результате или нарушении качества пятна | Снижает риск ложноотрицательного или недостоверного результата |
Скрининговый образец следует брать после начала энтерального питания, поскольку поступление белка необходимо для информативной оценки обмена фенилаланина. Недостаточное пропитывание карты, нанесение нескольких капель на одно место, загрязнение или неполное высушивание могут исказить результат. При выявлении повышенного фенилаланина ребёнок должен быть направлен на неотложное подтверждающее обследование и консультацию специалиста по наследственным болезням обмена.