2) эритроцитарная взвесь
3) кровь сухих пятен (+)
4) плазма
Правильный материал для первичного неонатального скрининга на галактоземию — кровь сухих пятен, то есть капиллярная цельная кровь, нанесённая на специальную фильтровальную бумагу и высушенная. Такой формат позволяет стандартизировать объём образца, сохранить исследуемые показатели при транспортировке и выполнять анализ в централизованной лаборатории без выделения отдельных фракций крови.
Скрининговые методы выявляют повышение общей галактозы и/или снижение активности галактозо-1-фосфат-уридилтрансферазы (GALT) в сухом пятне крови. При классической галактоземии вследствие дефицита GALT накапливаются галактоза-1-фосфат и галактитол, что после начала молочного питания может приводить к рвоте, желтухе, гипогликемии, поражению печени, катаракте и сепсису, особенно вызванному Escherichia coli. Реже причиной заболевания являются дефекты ферментов GALK1 или GALE.
Цельная венозная кровь без высушивания не является стандартным форматом первичного скрининга, поскольку методики валидированы для определённого объёма крови на фильтровальной бумаге. Эритроцитарная взвесь преимущественно используется на этапе подтверждения для определения активности GALT, так как этот фермент локализован в эритроцитах, а плазма — для дополнительного определения галактозы и оценки метаболических нарушений. Положительный результат скрининга не устанавливает окончательный диагноз и требует подтверждения ферментным и/или молекулярно-генетическим исследованием.
| Материал или метод | Основное исследование | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Кровь сухих пятен | Общая галактоза, иногда активность GALT | Стандартный материал первичного неонатального скрининга; удобен для высушивания и транспортировки |
| Цельная венозная кровь | Различные биохимические и генетические исследования | Не является стандартным форматом первичного скрининга на галактоземию |
| Эритроцитарная взвесь | Активность GALT, галактоза-1-фосфат в эритроцитах | Материал для подтверждающей диагностики; результат может искажаться после переливания крови |
| Плазма или сыворотка | Галактоза, показатели функции печени | Дополнительная оценка; не подходит для достоверного определения эритроцитарной активности GALT |
| Моча | Галактитол, восстанавливающие сахара | Вспомогательное исследование; признаки недостаточно специфичны для подтверждения галактоземии |
| ДНК из венозной крови | Патогенные варианты генов GALT, GALK1, GALE | Подтверждает молекулярную причину заболевания и помогает определить его тип |
Образец следует забирать до гемотрансфузии, поскольку донорские эритроциты способны временно нормализовать активность GALT и дать ложноотрицательный результат. Кровь должна равномерно пропитать обозначенную зону фильтровальной бумаги и полностью высохнуть до отправки в лабораторию. При положительном скрининге обследование проводят без промедления, а при наличии клинических проявлений лечение предполагаемой галактоземии начинают по профильному протоколу, не дожидаясь завершения всех подтверждающих тестов.