2) желчный бульон
3) пептонную воду 1% (+)
4) сахарный бульон
Однопроцентная пептонная вода служит транспортно-накопительной средой для холерного вибриона. Ее слабощелочная реакция, обычно pH 8,4–8,6, и наличие доступных источников азота создают благоприятные условия для сохранения жизнеспособности и быстрого размножения Vibrio cholerae. Щелочная среда одновременно подавляет значительную часть сопутствующей кишечной микрофлоры, что повышает вероятность последующего выделения возбудителя из испражнений, рвотных масс или ректальных мазков.
Холерные вибрионы характеризуются выраженной аэробностью и высокой скоростью роста: при инкубации в пептонной воде они концентрируются преимущественно в поверхностном слое, где содержание кислорода максимально. Уже через 6–8 часов может появляться нежная поверхностная пленка, из которой выполняют пересев на плотные селективно-дифференциальные среды, например TCBS-агар. Таким образом, пептонная вода не только поддерживает сохранность микроорганизма при транспортировке, но и обеспечивает этап первичного обогащения материала.
Кровяной агар пригоден для культивирования многих бактерий, однако не обеспечивает селективного накопления холерного вибриона и не предназначен для транспортировки клинического материала. Желчный и сахарный бульоны также не обладают оптимальным сочетанием щелочной реакции, питательных свойств и селективности, необходимых для преимущественного размножения V. cholerae.
| Среда или метод | Основное назначение | Значение при диагностике холеры |
|---|---|---|
| 1% пептонная вода | Транспортировка и первичное накопление | Поддерживает жизнеспособность вибрионов и способствует их быстрому росту |
| Щелочная пептонная вода | Селективное обогащение | Щелочной pH угнетает часть сопутствующей кишечной микрофлоры |
| TCBS-агар | Выделение изолированных колоний | Холерные вибрионы обычно образуют желтые колонии вследствие ферментации сахарозы |
| Кровяной агар | Культивирование широкого спектра бактерий | Может поддерживать рост вибрионов, но не является селективной транспортной средой |
| Желчный бульон | Обогащение некоторых энтеробактерий | Не считается стандартной транспортно-накопительной средой для V. cholerae |
| Сахарный бульон | Неспецифическое культивирование и оценка ферментации | Не подавляет конкурентную микрофлору и не обеспечивает селективного накопления |
| Среда Кэри—Блэра | Транспортировка кишечных патогенов при задержке исследования | Применяется для сохранения материала без выраженного размножения микроорганизмов |
Бактериологическое исследование следует начинать как можно раньше, поскольку результат зависит от соблюдения правил забора, температуры и сроков доставки материала. Из поверхностного слоя пептонной воды выполняют последовательные высевы на селективные среды с последующей идентификацией культуры по биохимическим и серологическим признакам. Окончательное подтверждение включает определение принадлежности к виду V. cholerae, серогруппам O1 или O139 и оценку токсигенности выделенного штамма. Использование транспортно-накопительной среды повышает чувствительность диагностики, особенно при небольшом количестве возбудителя в исходном образце.