2) люминисцентную риноцитоскопию смывов из носоглотки
3) серологические методы диагностики (ИФА, РНИФ, РА) (+)
4) внутрикожную аллергическую пробу
Серологические методы являются основой рутинного подтверждения туляремии, поскольку позволяют выявить специфический иммунный ответ к Francisella tularensis. При реакции агглютинации (РА) определяют антитела, вызывающие склеивание корпускулярного антигена; ИФА выявляет и количественно оценивает антитела классов IgM и IgG, а РНИФ основана на связывании антител с антигеном и визуализации иммунного комплекса с помощью флуоресцентной метки.
Антитела обычно становятся обнаруживаемыми со второй недели заболевания, поэтому наиболее информативно исследование парных сывороток, взятых с интервалом 7–14 дней. Диагностическое значение имеют сероконверсия, появление специфических антител в динамике или нарастание их титра в четыре раза и более. Положительный результат оценивают с учетом клинической картины, эпидемиологического анамнеза и возможной перекрестной реактивности; однократный низкий титр в эндемичном регионе не всегда подтверждает острую инфекцию.
ПЦР также может использоваться для прямого выявления ДНК возбудителя в клиническом материале и особенно полезна на ранних сроках, до формирования антительного ответа, однако в типовых алгоритмах подготовки к аттестации именно комплекс серологических реакций рассматривается как основной доступный способ специфической диагностики. Внутрикожная проба с туляремином отражает гиперчувствительность замедленного типа и свидетельствует о сенсибилизации, но не позволяет надежно отличить текущую инфекцию от перенесенной ранее или вакцинации. Люминесцентная риноцитоскопия не относится к стандартным методам подтверждения туляремии.
| Метод | Что выявляет | Оптимальные сроки или материал | Диагностическое значение и ограничения |
|---|---|---|---|
| ИФА | Специфические IgM и IgG к антигенам F. tularensis | Сыворотка крови; информативность возрастает со 2-й недели | Позволяет оценить фазу иммунного ответа и динамику антител; ранний отрицательный результат не исключает заболевание |
| РА | Агглютинирующие антитела | Парные сыворотки с интервалом 7–14 дней | Подтверждает инфекцию при диагностическом титре или его четырехкратном нарастании; возможны фоновые антитела |
| РНИФ | Антитела, связывающиеся с антигеном и выявляемые флуоресцентной меткой | Сыворотка крови, исследование в динамике | Специфичный серологический метод; результат интерпретируют совместно с клинико-эпидемиологическими данными |
| ПЦР | ДНК возбудителя | Материал из язвы, пунктат лимфатического узла, кровь и другие клинические образцы | Возможна ранняя диагностика до сероконверсии; чувствительность зависит от качества и сроков забора материала |
| Внутрикожная проба с туляремином | Клеточный иммунный ответ по типу гиперчувствительности замедленного типа | Обычно становится положительной через 2–3 недели от начала болезни | Подтверждает сенсибилизацию, но не различает свежую инфекцию, перенесенную туляремию и поствакцинальный иммунитет |
| Люминесцентная риноцитоскопия | Цитологические изменения слизистой носоглотки | Смывы из носоглотки | Не является стандартным специфическим методом диагностики туляремии |
При подозрении на туляремию серологическое исследование целесообразно выполнять повторно, если первая проба взята в ранние сроки. Наибольшую доказательность имеет сочетание нарастания титра антител с характерным лихорадочным синдромом, регионарным лимфаденитом, язвенно-бубонной, глазобубонной или орофарингеальной формой болезни и соответствующим эпидемиологическим анамнезом. Интерпретация результатов должна учитывать вакцинацию и ранее перенесенную инфекцию. Забор и обработку потенциально заразного материала проводят с соблюдением требований биологической безопасности.