2) серологический с определением низкоавидных IgG
3) серологический с определением IGM
4) биологический (заражение лабораторных животных)
Основу подтверждения холеры составляет бактериологическое исследование: выделение Vibrio cholerae из испражнений, рвотных масс или ректального мазка с последующей идентификацией культуры. Материал исследуют до начала антибактериальной терапии, поскольку вибрионы чувствительны к условиям хранения и транспортировки. Для повышения чувствительности используют обогащение в щелочной пептонной воде, затем посев на селективные среды, например тиосульфат-цитрат-желчно-сахарозный агар (TCBS).
Выделенный микроорганизм подтверждают по культуральным, биохимическим и серологическим признакам, включая агглютинацию диагностическими сыворотками к серогруппам O1 и O139. При необходимости определяют наличие генов холерного токсина, в частности ctxA и ctxB, методами ПЦР; это позволяет оценить эпидемиологически значимую токсигенность штамма. Серологические реакции с определением IgM или низкоавидных IgG не являются основным методом диагностики острой холеры: антительный ответ формируется с задержкой, а результаты могут зависеть от предшествующей инфекции или вакцинации. Заражение лабораторных животных в современной диагностике не применяется.
| Этап или метод | Диагностическое значение |
|---|---|
| Исследуемый материал | Свежие испражнения, рвотные массы, ректальный мазок; предпочтительно получить материал до начала антибиотикотерапии. |
| Обогащение | Щелочная пептонная вода создает благоприятные условия для размножения холерных вибрионов и подавляет часть сопутствующей микрофлоры. |
| Первичный посев | Селективные среды, включая TCBS-агар, позволяют выделить подозрительные колонии V. cholerae. |
| Видовая идентификация | Учитывают морфологию и подвижность вибриона, биохимические свойства, оксидазную реакцию и другие стандартные тесты. |
| Серогруппирование | Агглютинация с O1- и O139-сыворотками подтверждает принадлежность к основным холерным серогруппам, имеющим эпидемиологическое значение. |
| Определение токсигенности | ПЦР на гены холерного токсина или соответствующие молекулярные тесты помогают отличить токсигенные штаммы от нетоксигенных. |
| Серологические исследования | Могут иметь ретроспективное или эпидемиологическое значение, но не заменяют выделение возбудителя при острой диарее. |
| Биологическая проба | Заражение лабораторных животных является историческим подходом и не используется в рутинной современной диагностике. |
Положительный результат бактериологического исследования имеет наибольшую доказательную ценность, поскольку непосредственно подтверждает присутствие возбудителя в клиническом материале. Отрицательный посев не исключает холеру при позднем заборе материала, нарушении транспортировки или предварительном применении антибиотиков, поэтому исследование при необходимости повторяют. Экспресс-тесты и ПЦР могут ускорить выявление инфекции, однако культуральное подтверждение важно для серогруппирования, оценки чувствительности к препаратам и эпидемиологического надзора.