2) иммуноферментного анализа
3) фотометрии
4) потенциометрии
Электрофорез позволяет разделять белки сыворотки по их электрофоретической подвижности — скорости перемещения в электрическом поле. Она зависит преимущественно от суммарного заряда белковой молекулы при заданном pH, а также от её размера и формы. При исследовании на агарозном геле или в капилляре белки распределяются по зонам, после чего интенсивность каждой зоны оценивают денситометрически.
На электрофореграмме в норме выделяют альбуминовую, α1-, α2-, β- и γ-фракции. Изменение их соотношения имеет диагностическое значение: при воспалении увеличиваются белки острой фазы в α-зонах, при нефротическом синдроме снижается альбумин и возрастает α2-фракция, а при моноклональной гаммапатии появляется узкий пик М-компонента. Для анализа используют именно сыворотку, поскольку фибриноген плазмы при электрофорезе создаёт дополнительную β–γ-зону.
Иммуноферментный анализ выявляет и количественно определяет конкретные антигены или антитела, но не разделяет весь спектр сывороточных белков на фракции. Фотометрия измеряет интенсивность светопоглощения раствора, а потенциометрия — активность ионов с помощью электродов; эти методы не обеспечивают электрофоретического разделения белков.
| Фракция или находка | Основные компоненты | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Альбуминовая | Альбумин | Снижение наблюдается при нарушении синтеза в печени, потере белка через почки или кишечник, воспалении; относительное повышение возможно при обезвоживании. |
| α1-фракция | α1-антитрипсин, α1-кислый гликопротеин | Увеличивается как проявление ответа острой фазы; снижение α1-антитрипсина может указывать на его наследственный дефицит. |
| α2-фракция | Гаптоглобин, церулоплазмин, α2-макроглобулин | Возрастает при воспалении и нередко при нефротическом синдроме; выраженность изменений помогает оценивать характер диспротеинемии. |
| β-фракция | Трансферрин, компоненты комплемента, β-липопротеины | Изменяется при нарушениях обмена липидов, дефиците железа, воспалении и некоторых иммунопролиферативных заболеваниях. |
| γ-фракция | Преимущественно иммуноглобулины | Поликлональное увеличение характерно для хронического воспаления и аутоиммунных заболеваний; снижение возможно при иммунодефицитах. |
| М-компонент | Моноклональный иммуноглобулин или его фрагмент | Узкий пик, чаще в γ- или β-зоне, требует подтверждения иммунофиксацией и оценки свободных лёгких цепей при подозрении на моноклональную гаммапатию. |
Электрофорез может выполняться на агарозном геле или капиллярным способом; оба варианта формируют профиль распределения белковых фракций. Метод оценивает не только абсолютные концентрации, но и характер их соотношения и форму пиков. При обнаружении подозрительного моноклонального компонента применяют иммунофиксацию, которая уточняет его класс и тип лёгких цепей.