2) электрофореза белков мембраны эритроцита
3) определения типов гемоглобина (+)
4) эозин-5-малеимидового окрашивания эритроцитов
Скрининговые эритроцитарные индексы позволяют заподозрить талассемию при микроцитозе и гипохромии, непропорциональных степени анемии, особенно если число эритроцитов сохранено или повышено. Однако формулы, включая индекс Ментцера, не подтверждают заболевание: сходные изменения возможны при железодефиците и некоторых других микроцитарных анемиях.
Следующим этапом служит качественное и количественное определение фракций гемоглобина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, капиллярного электрофореза или другого валидированного метода. Исследование устанавливает соотношение HbA, HbA2 и HbF, а также выявляет патологические варианты гемоглобина. Для носительства β-талассемии типично повышение HbA2 более 3,5%, иногда сочетающееся с умеренным увеличением HbF; при тяжелых формах β-талассемии доля HbF значительно возрастает, а HbA снижается или отсутствует.
Молекулярно-генетическое исследование генов HBB, HBA1 и HBA2 особенно важно при пограничных или нормальных результатах анализа фракций гемоглобина, подозрении на α-талассемию, сложном сочетании гемоглобинопатий либо необходимости определить конкретный генотип. Перед интерпретацией результатов следует исключить дефицит железа и учитывать возраст ребенка, недавние гемотрансфузии и возрастные изменения концентраций HbF и HbA2.
| Диагностический этап или состояние | Характерные лабораторные признаки | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Скрининг по общему анализу крови | Снижение MCV и MCH, нормальное или повышенное число эритроцитов; индекс Ментцера часто менее 13 | Позволяет заподозрить талассемический тип микроцитоза, но не является подтверждающим исследованием |
| Оценка обмена железа | Ферритин, насыщение трансферрина и другие показатели запасов железа обычно не снижены | Необходима для дифференциальной диагностики с железодефицитной анемией |
| Определение типов гемоглобина | Количественная оценка HbA, HbA2, HbF и патологических фракций методом ВЭЖХ или электрофореза | Основной лабораторный метод подтверждения и классификации гемоглобинопатии |
| Носительство β-талассемии | Повышение HbA2 более 3,5%, возможное умеренное повышение HbF | Характерный профиль нарушения синтеза β-глобиновых цепей |
| β-талассемия тяжелого течения | Значительное преобладание HbF, резкое снижение или отсутствие HbA | Указывает на выраженное уменьшение либо прекращение синтеза β-глобина |
| α-талассемия | При носительстве фракции гемоглобина могут быть нормальными; при HbH-болезни или в неонатальном периоде могут выявляться HbH и Hb Bart’s | Нормальный профиль гемоглобина не исключает легкую α-талассемию, поэтому часто требуется анализ HBA1/HBA2 |
| Альтернативные исследования | Проба Кумбса выявляет иммунное повреждение эритроцитов; эозин-5-малеимидовый тест и анализ мембранных белков применяют при мембранопатиях | Эти методы предназначены для диагностики других причин гемолиза и не подтверждают дефект синтеза глобиновых цепей |
Определение фракционного состава гемоглобина переводит предварительное предположение, основанное на расчетных индексах, в лабораторно обоснованный диагноз. При подозрении на α-талассемию диагностическая ценность стандартного электрофоретического профиля ограничена, особенно при носительстве одной или двух мутаций. Генетическое подтверждение позволяет уточнить форму заболевания, оценить риск тяжелой талассемии у будущих детей и провести обоснованное медико-генетическое консультирование. Результаты необходимо интерпретировать совместно с показателями обмена железа, мазком периферической крови и клиническими данными.