2) обратимом связывании ионов Са2+ (+)
3) стимуляции связывания тромбина с антитромбином
4) блокаде антитромбина
Антикоагулянтное действие цитрата натрия связано с хелатированием ионов кальция: цитрат образует с ними растворимые комплексы и снижает концентрацию ионизированного Ca2+ в плазме. Кальций необходим для активации ряда факторов свертывания, формирования теназного и протромбиназного комплексов, а также образования фибрина. Поэтому при его временном дефиците каскад коагуляции прекращается.
Связывание Ca2+ цитратом является обратимым. При добавлении избытка кальция в лабораторном исследовании ионизированная фракция восстанавливается, и свертывание плазмы возобновляется; на этом принципе основано определение протромбинового времени, активированного частичного тромбопластинового времени и других коагулологических показателей. Цитрат не стимулирует взаимодействие тромбина с антитромбином и не блокирует антитромбин, поскольку эти механизмы характерны для действия гепарина.
Для исследования системы гемостаза обычно используют пробирки с 3,2% раствором цитрата натрия при соотношении кровь:антикоагулянт 9:1. Нарушение этого соотношения, особенно недолив пробирки, приводит к избытку цитрата и может вызвать искусственное удлинение времени свертывания.
| Антикоагулянт | Основной механизм | Типичные исследования или применение | Особенности |
|---|---|---|---|
| Цитрат натрия | Обратимое связывание ионизированного Ca2+ | Коагулограмма: ПВ/МНО, АЧТВ, фибриноген, D-димер | Важны соотношение 9:1 и корректировка объема цитрата при высоком гематокрите |
| ЭДТА | Прочное комплексообразование с Ca2+ | Общий анализ крови, подсчет клеток крови | Не подходит для большинства коагулологических тестов, поскольку может повреждать клеточные элементы и изменять активность факторов |
| Гепарин | Усиление действия антитромбина, ингибирование тромбина и фактора Xa | Биохимические и некоторые иммунологические исследования плазмы, терапия тромбозов | Не используется как стандартный антикоагулянт для базовой коагулограммы |
| Оксалаты | Образование малорастворимых солей кальция | Отдельные специализированные лабораторные методики | Избыток может вызывать морфологические изменения клеток и поэтому ограничивает применение |
| Фторид натрия в сочетании с оксалатом | Оксалат связывает Ca2+, фторид подавляет гликолиз | Исследование глюкозы при необходимости стабилизации образца | Применяется преимущественно для сохранения концентрации глюкозы, а не для коагулологических тестов |
| Кислый цитратно-декстрозный раствор | Цитрат связывает Ca2+, декстроза поддерживает метаболическую стабильность клеток | Заготовка и хранение компонентов крови | Состав и концентрация компонентов подбираются с учетом длительности хранения |
При поступлении цитратной плазмы в лабораторию оценивают правильность заполнения пробирки, наличие сгустков и соответствие образца назначенному исследованию. Значительное повышение гематокрита уменьшает объем плазмы и требует расчета количества цитрата, иначе результаты могут быть ложно изменены. После отделения плазмы нельзя произвольно заменять цитратную пробу сывороткой или образцом с ЭДТА, поскольку это меняет матрицу и условия измерения. Таким образом, обратимое удаление Ca2+ обеспечивает одновременно сохранность образца и возможность последующего восстановления свертывания.