2) методом Кротова
3) посевом уколом
4) диско-диффузионным
Метод Дригальского основан на механическом разобщении микробных клеток при их поверхностном распределении по плотной питательной среде. Исследуемый материал наносят на агар и последовательно растирают стерильным шпателем по участкам чашки; по мере продвижения количество клеток в инокулюме уменьшается. Отдельные клетки или небольшие клеточные группы оказываются пространственно разделёнными и после инкубации формируют изолированные колонии.
Изолированную колонию используют для пересева на свежую питательную среду и получения чистой культуры, то есть популяции микроорганизмов одного вида, происходящей из одной клетки или клона. Надёжность выделения оценивают не только по морфологии колонии, но и по однородности микроскопической картины, тинкториальных свойств, культуральных и биохимических признаков. Метод Кротова связан преимущественно с количественным исследованием микрофлоры воздуха, посев уколом применяют для изучения роста по глубине среды и подвижности, а диско-диффузионный метод — для определения чувствительности бактерий к антибиотикам.
| Метод | Принцип | Основное назначение | Диагностический результат |
|---|---|---|---|
| Дригальского | Механическое рассеивание материала по поверхности агара с постепенным уменьшением плотности посева | Выделение изолированных колоний и получение чистой культуры | Раздельно расположенные колонии, пригодные для пересева |
| Штриховой посев петлёй | Последовательное нанесение материала штрихами на сектора чашки | Рутинное получение изолированных колоний | Колонии в последних секторах посева |
| Посев уколом | Введение инокулюма иглой в толщу полужидкой или плотной среды | Оценка подвижности, характера роста по глубине, культивирование анаэробов | Рост по линии укола или диффузное распространение в среде |
| Метод Кротова | Осаждение аэрозольных частиц воздуха на питательную среду в специальном устройстве | Количественная оценка микробной обсеменённости воздуха | Число выросших колоний с расчётом содержания микроорганизмов в объёме воздуха |
| Диско-диффузионный | Диффузия антибиотика из диска в агар с формированием градиента концентраций | Определение фенотипической чувствительности бактерий к антибактериальным препаратам | Диаметр зоны задержки роста вокруг диска |
| Пересева из изолированной колонии | Перенос клеток одной морфологически однородной колонии на свежую среду | Подтверждение и поддержание чистоты культуры | Однородный рост и совпадение идентификационных признаков |
Ключевым критерием метода Дригальского является пространственное разделение клеток на поверхности плотной среды за счёт последовательного механического растирания. Этот подход особенно важен при работе с материалом, содержащим смешанную микрофлору. Полученные колонии подвергают идентификации с использованием микроскопии, культуральных, биохимических, масс-спектрометрических или молекулярно-генетических методов. Таким образом, правильный ответ — метод Дригальского.