2) иммуноферментный анализ (+)
3) реакцию гемадсорбции
4) реакцию Нейфельда
Иммуноферментный анализ применяют для выявления в моче растворимого антигена Legionella pneumophila серогруппы 1, преимущественно термостабильного липополисахаридного компонента бактериальной клетки. Метод основан на специфическом связывании антигена с антителами, фиксированными на твёрдой фазе. Образовавшийся иммунный комплекс обнаруживают с помощью конъюгата, содержащего ферментную метку: после добавления субстрата развивается окрашивание, интенсивность которого отражает наличие антигена в образце.
Исследование мочи удобно для быстрой диагностики болезни легионеров, поскольку антиген может определяться уже в ранние сроки заболевания, а результат не зависит от предшествующего назначения антибиотиков в той степени, в какой от него зависит культуральное исследование. Положительный результат у пациента с клинико-рентгенологическими признаками пневмонии служит весомым подтверждением инфекции, вызванной L. pneumophila серогруппы 1.
Ограничение метода заключается в его серогрупповой специфичности: отрицательный результат не исключает легионеллёз, вызванный другими серогруппами L. pneumophila или иными видами Legionella. Поэтому исследование мочевого антигена рекомендуется сочетать с исследованием материала из нижних дыхательных путей методом полимеразной цепной реакции или посевом на специальные питательные среды.
| Метод | Диагностическая мишень | Материал | Значение и ограничения |
|---|---|---|---|
| Иммуноферментный анализ | Растворимый антиген L. pneumophila серогруппы 1 | Моча | Быстрое специфическое выявление антигена с помощью антител и ферментной метки |
| Иммунохроматографический тест | Тот же мочевой антиген | Моча | Экспресс-вариант иммуноанализа; результат оценивают по появлению тестовой линии |
| Полимеразная цепная реакция | ДНК бактерий рода Legionella | Мокрота, бронхоальвеолярный лаваж | Позволяет выявлять различные виды и серогруппы, включая не определяемые мочевым тестом |
| Культуральное исследование | Жизнеспособные легионеллы | Материал из нижних дыхательных путей | Обеспечивает видовую идентификацию и эпидемиологическое типирование, но требует специальных сред и времени |
| Встречный иммуноэлектрофорез | Преципитирующие комплексы антиген–антитело | Биологические жидкости | Исторический метод с недостаточной чувствительностью; не является стандартным способом диагностики легионеллёза |
| Реакция гемадсорбции | Способность инфицированных клеток адсорбировать эритроциты | Клеточная культура | Используется преимущественно в вирусологии и не предназначена для выявления антигена легионелл в моче |
| Реакция Нейфельда | Капсульный антиген бактерий | Бактериальная культура или клинический материал | Основана на феномене набухания капсулы; классически применяется для типирования пневмококков |
Мочевой антигенный тест особенно полезен при тяжёлой внебольничной или госпитальной пневмонии, наличии гипонатриемии, диареи, неврологических нарушений либо эпидемиологических данных о контакте с аэрозолями водных систем. Сохранение антигена в моче в течение нескольких недель означает, что положительный результат не подходит для оценки эффективности лечения. Отрицательный тест не должен служить основанием для прекращения обследования при высокой клинической вероятности легионеллёза. Диагностическая стратегия должна включать параллельное исследование респираторного материала, позволяющее расширить спектр выявляемых легионелл.