2) резко встряхнуть пробирку
3) пробирку не встряхивать и не переворачивать
4) перемешать кровь с антикоагулянтом, плавно переворачивая пробирку несколько раз (+)
После заполнения вакуумной пробирки кровь необходимо сразу смешать с содержащимся в ней антикоагулянтом. Для этого пробирку плавно переворачивают несколько раз, обычно ориентируясь на инструкцию производителя, чаще всего выполняя 8–10 инверсий. Такой способ обеспечивает равномерное распределение антикоагулянта по всему объёму образца и предотвращает образование микросгустков, которые могут исказить результаты иммуногематологического исследования.
Резкое встряхивание недопустимо, поскольку вызывает гемолиз эритроцитов, образование пены и механическое повреждение клеток. Гемолиз и наличие микросгустков ухудшают качество образца, могут затруднить оценку агглютинации эритроцитов при определении антигенов системы ABO и резус-принадлежности, а также стать причиной сомнительного или недостоверного результата. Отсутствие перемешивания также опасно: кровь контактирует с антикоагулянтом неравномерно, поэтому в пробирке формируются фибриновые нити и сгустки.
Пробирку перемешивают непосредственно после взятия крови, до установки в штатив, не встряхивая её и не оставляя неподвижной. Техника инверсий должна быть мягкой: пробирку полностью переворачивают и возвращают в исходное положение без резких движений и ударов о поверхность. При обнаружении выраженного гемолиза, сгустка или недостаточного заполнения пробирки образец обычно считают непригодным и проводят повторный забор.
| Ситуация при обращении с образцом | Механизм | Возможное последствие |
|---|---|---|
| Плавное переворачивание пробирки сразу после забора | Равномерное смешивание крови с антикоагулянтом | Сохранение клеточного состава и получение пригодного образца для определения ABO и Rh |
| Резкое встряхивание | Механическое повреждение эритроцитов, интенсивное образование пены | Гемолиз, ухудшение визуальной оценки реакции агглютинации, риск недостоверного результата |
| Отсутствие перемешивания | Неравномерный контакт форменных элементов с антикоагулянтом | Формирование микросгустков и фибрина, непригодность образца |
| Недостаточное число инверсий | Часть крови остаётся практически без антикоагулянта | Локальное свертывание и нарушение воспроизводимости исследования |
| Избыточное перемешивание с ударным воздействием | Механический стресс для эритроцитов и клеточных мембран | Гемолиз, возможное изменение внешнего вида и аналитических характеристик образца |
| Недостаточное заполнение пробирки с антикоагулянтом | Нарушение установленного соотношения крови и реагента | Изменение условий исследования и необходимость повторного забора по локальному СОП |
| Видимый сгусток или фибриновые нити | Частичное свертывание крови до или после смешивания | Образец бракуют, поскольку распределение эритроцитов и интерпретация агглютинации могут быть нарушены |
Таким образом, ключевым принципом является мягкое, но достаточное перемешивание образца сразу после его получения. Это сохраняет эритроциты в суспензии и предотвращает свертывание крови. Качество преаналитического этапа непосредственно влияет на достоверность определения группы крови и резус-принадлежности. При нарушении техники взятия или перемешивания предпочтителен повторный забор материала, а не интерпретация сомнительного результата.