2) иммуноглобулинов класса Е
3) определенных белков в составе мембраны эритроцитов
4) определенных липидов в составе мембраны эритроцитов
Проба Кумбса, или антиглобулиновый тест, предназначена для выявления антител, направленных против антигенов эритроцитов. В основе метода лежит добавление антиглобулиновой сыворотки, содержащей антитела к человеческим иммуноглобулинам и/или компонентам комплемента. Если эритроциты предварительно сенсибилизированы иммуноглобулинами класса IgG или фрагментами комплемента, антиглобулин связывает их и вызывает видимую агглютинацию.
При прямом антиглобулиновом тесте исследуют эритроциты пациента и определяют антитела или комплемент, фиксированные на их поверхности in vivo. Метод применяют при подозрении на аутоиммунную гемолитическую анемию, гемолитическую болезнь плода и новорождённого, посттрансфузионные гемолитические реакции. Непрямой тест выявляет свободные антиэритроцитарные антитела в сыворотке; он используется при подборе совместимой крови, скрининге антител у беременных и оценке риска иммунного конфликта.
Таким образом, диагностической мишенью являются не IgE и не структурные липиды мембраны, а иммунологические факторы, способные специфически взаимодействовать с антигенами эритроцитов. Наиболее часто клинически значимы антитела IgG, однако реакция может отражать и фиксацию компонентов комплемента, прежде всего C3d.
| Вариант теста или признак | Исследуемый материал | Что выявляется | Основное диагностическое применение |
|---|---|---|---|
| Прямой антиглобулиновый тест | Эритроциты пациента | IgG и/или компоненты комплемента, уже связанные с эритроцитами | Аутоиммунная гемолитическая анемия, гемолитическая болезнь новорождённых, посттрансфузионный гемолиз |
| Непрямой антиглобулиновый тест | Сыворотка пациента и тест-эритроциты | Свободные антиэритроцитарные антитела в сыворотке | Скрининг антител, проба на совместимость, пренатальная диагностика |
| IgG-опосредованная сенсибилизация | Эритроциты с фиксированным IgG | Неполные антитела, обычно не вызывающие агглютинацию без антиглобулина | Выявление иммунного гемолиза при тёплой аутоиммунной гемолитической анемии |
| Комплемент-опосредованная реакция | Эритроциты с фрагментами C3 | Связанные компоненты комплемента | Диагностика отдельных иммунных гемолитических состояний, включая холодовую агглютининовую болезнь |
| Положительная реакция | Эритроцитарная взвесь после добавления антиглобулина | Агглютинация различной степени выраженности | Подтверждает наличие иммунной сенсибилизации, но интерпретируется вместе с клиническими данными |
| Отрицательная реакция | Эритроцитарная взвесь | Отсутствие обнаруживаемого IgG или комплемента на эритроцитах либо антител в сыворотке | Снижает вероятность иммунного механизма, но не исключает его при низком титре или технических ограничениях |
Результат антиглобулинового теста оценивают с учётом типа исследования, клинической картины и признаков гемолиза: анемии, повышения непрямого билирубина, лактатдегидрогеназы и снижения гаптоглобина. Положительный прямой тест указывает на иммунную сенсибилизацию эритроцитов, но сам по себе не определяет причину гемолиза. Для уточнения специфичности антител применяют идентификационные панели и дополнительные иммуногематологические исследования.