2) зоной амплификации
3) зоной приема и регистрации
4) каждой рабочей зоной (+)
Закрепление индивидуального комплекта холодильного и морозильного оборудования за каждой рабочей зоной является принципом зонирования лаборатории и предупреждения контаминации. В молекулярно-генетическом исследовании материал последовательно проходит преаналитический этап, выделение нуклеиновых кислот, постановку амплификации и, при необходимости, постамплификационный анализ. Общий холодильник или морозильник для разных зон может привести к переносу аэрозолей, капель образца, ампликонов и остатков реакционной смеси на упаковки, ручки и внутренние поверхности оборудования.
Раздельное оборудование обеспечивает физическое и организационное разделение образцов, реагентов, контрольных материалов и продуктов амплификации. Это особенно важно после ПЦР, поскольку ампликоны присутствуют в очень высокой концентрации и являются основным источником ложноположительной контаминации. Оборудование маркируют по зоне и назначению, не перемещают между помещениями, оснащают средствами контроля температуры и ведут соответствующую регистрацию; температурный режим выбирают по требованиям к конкретным материалам, например +2…+8 °C, около −20 °C или ультранизкотемпературное хранение.
Такой подход поддерживает принцип однонаправленного движения материала — от менее загрязнённых этапов к более загрязнённым — и повышает прослеживаемость лабораторного процесса. Поэтому комплект холодильного оборудования должен быть закреплён не за отдельным видом реагента или одним помещением в целом, а за каждой рабочей зоной, где хранятся и используются биологические материалы.
| Рабочая зона | Основные материалы | Назначение отдельного оборудования | Ключевой риск при совместном хранении |
|---|---|---|---|
| Приём и регистрация | Первичные образцы, транспортные среды, временно хранящиеся биоматериалы | Сохранение стабильности образцов до передачи на исследование и разделение их от реагентов | Перекрёстная контаминация образцов и нарушение прослеживаемости |
| Выделение нуклеиновых кислот | Лизаты, исходные образцы, наборы для экстракции, контрольные материалы | Раздельное хранение клинического материала и компонентов экстракции | Перенос биологического материала на реагенты и поверхности |
| Подготовка реакционных смесей | Праймеры, зонды, ферменты, буферы, мастер-миксы | Защита реагентов от образцов и ампликонов, соблюдение требуемого температурного режима | Ложноположительные результаты вследствие заноса матрицы или продуктов ПЦР |
| Амплификация | Подготовленные реакционные пробирки и планшеты | Стабильное хранение материалов до запуска и исключение обратного перемещения | Распространение ампликонов в зоны доамплификационной подготовки |
| Постамплификационный анализ | Продукты ПЦР, контрольные и исследуемые ампликоны | Изоляция наиболее загрязняющего этапа от чистых зон | Аэрозольная контаминация реагентов, образцов и оборудования |
| Контроль и мониторинг | Калибраторы, контрольные образцы, архивные материалы | Сохранение стабильности материалов и документирование температурных условий | Потеря аналитической достоверности из-за температурных колебаний или смешения партий |
Раздельное холодильное оборудование является частью системы обеспечения качества, а не только способом хранения. Его применение сочетается с маркировкой, регулярной дезинфекцией, контролем температуры и соблюдением маршрута движения персонала и материалов. Нарушение зонирования может искажать результаты даже при технически исправной амплификационной системе. Следовательно, закрепление индивидуального комплекта за каждой рабочей зоной снижает риск преаналитических и аналитических ошибок.