2) диаскинтест
3) квантифероновый тест
4) реакцию Манту
К молекулярно-генетическим методам диагностики туберкулёза относятся тесты, основанные на полимеразной цепной реакции (ПЦР). Их принцип заключается в многократном копировании специфических участков ДНК микобактерий комплекса Mycobacterium tuberculosis с последующей детекцией амплифицированного генетического материала. Современные тест-системы позволяют исследовать мокроту и другие клинические образцы, быстро подтверждать наличие возбудителя, а в некоторых случаях одновременно выявлять мутации, связанные с устойчивостью к рифампицину и изониазиду.
ПЦР относится к прямым методам диагностики: она обнаруживает сам возбудитель или его нуклеиновую кислоту, а не реакцию иммунной системы пациента. Это особенно важно при раннем выявлении заболевания и при невозможности быстро получить результат культурального исследования. Вместе с тем обнаружение ДНК не всегда свидетельствует о жизнеспособности микобактерий, поэтому результат оценивают совместно с клиническими, лучевыми и микробиологическими данными; отрицательный результат не исключает туберкулёз при низкой бактериальной нагрузке или некачественном образце.
Диаскинтест, квантифероновый тест и реакция Манту являются иммунологическими методами. Они выявляют сенсибилизацию организма к антигенам микобактерий: кожные тесты оценивают реакцию замедленного типа, а квантифероновый тест — продукцию интерферона-γ Т-лимфоцитами in vitro. Эти исследования помогают выявить инфицирование M. tuberculosis, но не являются прямым доказательством активного туберкулёзного процесса и не относятся к молекулярно-генетической диагностике.
| Метод | Что выявляет | Принцип | Основное диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| ПЦР и другие NAAT-тесты | ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса | Амплификация специфических участков нуклеиновой кислоты с детекцией продукта | Прямое быстрое подтверждение наличия возбудителя |
| Молекулярные тесты на лекарственную устойчивость | Мутации в генах устойчивости, например rpoB, katG, inhA | ПЦР-амплификация и выявление генетических маркеров резистентности | Ориентировочная быстрая оценка устойчивости к отдельным препаратам |
| Диаскинтест | Клеточный иммунный ответ на ESAT-6 и CFP-10 | Внутрикожная проба с оценкой инфильтрата через 72 часа | Выявление сенсибилизации, связанной преимущественно с M. tuberculosis |
| Квантифероновый тест | Интерферон-γ, высвобождаемый сенсибилизированными Т-лимфоцитами | Инкубация крови с туберкулёзными антигенами и лабораторное измерение IFN-γ | Выявление иммунологического инфицирования без определения локализации и активности процесса |
| Реакция Манту | Гиперчувствительность замедленного типа к туберкулину | Внутрикожное введение туберкулина с оценкой папулы | Скрининговая оценка инфицированности; возможна реакция после вакцинации БЦЖ |
| Культуральное исследование | Живые микобактерии | Посев материала на питательные среды с последующей идентификацией | Подтверждение жизнеспособности возбудителя и выполнение фенотипического теста лекарственной чувствительности |
Таким образом, отличительным признаком ПЦР является обнаружение специфического генетического материала возбудителя непосредственно в клиническом образце. Иммунологические тесты отражают факт сенсибилизации и не позволяют надёжно различить латентную инфекцию и активное заболевание. При подозрении на туберкулёз результаты ПЦР сопоставляют с микроскопией, посевом, лучевой диагностикой и клинической картиной. Выбор образца и метода существенно влияет на чувствительность исследования.