2) гликоген в диффузно-гранулярном виде
3) миелопероксидазу
4) кислую фосфатазу, не ингибируемую тартратом натрия (+)
Для волосатоклеточного лейкоза классическим цитохимическим признаком является выявление кислой фосфатазы, устойчивой к ингибированию тартратом натрия (TRAP-реакция). Такая активность связана с накоплением в цитоплазме опухолевых В-лимфоцитов лизосомального изофермента кислой фосфатазы, сохраняющего каталитическую активность в присутствии тартрата. В мазках клетки имеют характерные тонкие цитоплазматические выросты, напоминающие волоски .
Остальные реакции не являются специфичными для этого заболевания: альфа-нафтилэстераза, не подавляемая NaF, более характерна для клеток моноцитарного ряда, миелопероксидаза указывает на миелоидную дифференцировку, а диффузно-гранулярная реакция на гликоген встречается при других лимфоидных и гемобластозах. В современной диагностике TRAP-реакция имеет преимущественно историческое и подтверждающее значение; диагноз устанавливают с учетом морфологии, иммунофенотипа и молекулярных маркеров.
| Признак | Волосатоклеточный лейкоз | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Кислая фосфатаза | Выраженная активность, не ингибируемая тартратом натрия | Классический цитохимический признак TRAP-положительных волосатых клеток |
| Морфология периферической крови | Зрелые лимфоидные клетки с тонкими цитоплазматическими выростами | Формирует характерный образ волосатой клетки |
| Иммунофенотип | CD19+, CD20+, CD22+, CD11c+, CD25+, CD103+, CD123+ | Сочетание маркеров зрелой В-клеточной опухоли с CD103 и CD11c поддерживает диагноз |
| Молекулярный маркер | Мутация BRAF V600E типична для классического варианта | Помогает подтвердить диагноз и отличить классический вариант от волосатоклеточного лейкоза-варианта |
| Костный мозг | Инфильтрация опухолевыми клетками, часто выраженный миелофиброз | Может приводить к сухой пункции; трепанобиопсия информативнее аспирата |
| Периферическая кровь и клиника | Панцитопения, моноцитопения, спленомегалия | Отражает вытеснение нормального кроветворения и селезеночную секвестрацию клеток |
| Волосатоклеточный лейкоз-вариант | TRAP и CD25 могут быть отрицательными или менее выраженными, BRAF V600E обычно отсутствует | Важен для дифференциальной диагностики при атипичном иммунофенотипе и клиническом течении |
В настоящее время подтверждение классического волосатоклеточного лейкоза основывается прежде всего на проточной цитометрии и выявлении характерного В-клеточного иммунофенотипа. Мутация BRAF V600E выявляется у большинства пациентов с классическим вариантом и имеет диагностическое и терапевтическое значение. Для лечения применяют пуриновые аналоги, прежде всего кладрибин, а при резистентности или рецидиве могут использовать ингибиторы BRAF и другие таргетные подходы.