2) люминесцентной микроскопии
3) окраски по Граму
4) раздавленной капли (+)
Метод раздавленной капли применяют для микроскопии живых, нефиксированных и неокрашенных бактерий, то есть для исследования нативного препарата. Каплю микробной суспензии помещают между предметным и покровным стеклами, вследствие чего образуется тонкий слой жидкости, пригодный для оценки формы, взаимного расположения и прежде всего активной подвижности микроорганизмов.
Диагностически важно отличать истинное направленное движение бактерий, обусловленное работой жгутиков, от броуновского движения — беспорядочных колебаний клеток под действием молекул жидкости. Окраска по Граму и метод Бурри предполагают приготовление окрашенного препарата и используются соответственно для дифференциации бактерий по строению клеточной стенки и выявления капсул. Люминесцентная микроскопия требует специальных флуорохромов или меченых антител и не является стандартным способом исследования необработанной культуры.
| Метод | Тип препарата | Основная диагностическая задача | Особенности |
|---|---|---|---|
| Раздавленная капля | Живой, нативный | Определение подвижности, формы и расположения бактерий | Капля культуры распределяется тонким слоем под покровным стеклом |
| Висячая капля | Живой, нативный | Длительное наблюдение за активной подвижностью | Капля находится в углублении и медленнее высыхает |
| Окраска по Граму | Фиксированный, окрашенный | Разделение бактерий на грамположительные и грамотрицательные | Подвижность живых клеток оценить невозможно |
| Окраска по Бурри | Высушенный препарат с негативным фоном | Выявление капсулы и контуров микробной клетки | Фон окрашивается тушью, капсула выглядит как светлый ореол |
| Люминесцентная микроскопия | Обработанный флуорохромом | Быстрое обнаружение определённых микроорганизмов или антигенов | Требует специального микроскопа и флуоресцентных меток |
| Броуновское движение | Наблюдается в нативном препарате | Не является признаком истинной подвижности | Клетки колеблются на месте без направленного перемещения |
При работе с методом раздавленной капли необходимо использовать молодую культуру, поскольку старение микроорганизмов может сопровождаться снижением их подвижности. Препарат исследуют сразу после приготовления, не допуская высыхания и перегрева от осветителя. Метод имеет ориентировочное значение и при необходимости дополняется окрашиванием, культуральным исследованием и биохимической идентификацией возбудителя.