2) лизоцима
3) дефензимов
4) фагоцитоза (+)
НСТ-тест (тест восстановления нитросинего тетразолия, NBT) используется для оценки функциональной активности фагоцитов, прежде всего нейтрофилов. После стимуляции фагоцитарной клетки активируется респираторный взрыв — резкое усиление потребления кислорода и образование активных форм кислорода. Супероксид-анион, генерируемый системой НАДФН-оксидазы, восстанавливает бесцветный нитросиний тетразолий до нерастворимого синего формазана; по числу окрашенных клеток судят об активности кислородзависимого механизма внутриклеточного уничтожения микроорганизмов.
Таким образом, метод оценивает не только сам факт поглощения частиц, но и важнейший бактерицидный этап фагоцитоза — способность нейтрофила сформировать полноценный респираторный взрыв. Определяют спонтанное и стимулированное восстановление НСТ, а также индекс стимуляции. Резкое снижение или отсутствие реакции характерно для дефекта НАДФН-оксидазного комплекса, прежде всего при хронической гранулематозной болезни, сопровождающейся рецидивирующими инфекциями, вызванными каталазоположительными микроорганизмами.
Комплемент, лизоцим и дефензины относятся к другим факторам врождённой защиты и данным тестом непосредственно не измеряются. При подозрении на дефект оксидативного метаболизма в настоящее время часто используют более чувствительный проточный тест с дигидрородамином-123 (DHR), однако НСТ-тест сохраняет диагностическое значение как функциональная оценка фагоцитарной активности.
| Показатель или метод | Принцип | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Спонтанный НСТ-тест | Определение восстановления НСТ без дополнительного стимулятора | Характеризует исходную активность нейтрофилов; повышение возможно при воспалении и инфекции |
| Стимулированный НСТ-тест | Оценка образования формазана после активации фагоцитов | Основной вариант исследования респираторного взрыва и кислородзависимого бактерицидного механизма |
| Нормальная реакция | Появление синего формазана в значительной доле стимулированных нейтрофилов | Свидетельствует о сохранности НАДФН-оксидазной системы |
| Хроническая гранулематозная болезнь | Нарушение образования супероксид-аниона вследствие дефекта компонентов НАДФН-оксидазы | Стимулированный НСТ резко снижен или отрицателен; возможны рецидивирующие глубокие инфекции и гранулёмы |
| Тест с DHR-123 | Флуоресцентная регистрация окисления дигидрородамина в проточном цитометре | Более чувствительная и количественная альтернатива НСТ; позволяет выявлять носительство у женщин и различные варианты дефекта |
| Исследование комплемента | Определение компонентов C3, C4, общей гемолитической активности и других параметров | Оценивает гуморальный каскад комплемента, а не функциональный респираторный взрыв фагоцитов |
| Определение лизоцима и дефензинов | Измерение растворимых антимикробных факторов врождённой защиты | Характеризует отдельные эффекторные молекулы, но не заменяет функциональное исследование фагоцитов |
Интерпретировать НСТ-тест следует с учётом клинической картины, возраста и наличия текущего воспалительного процесса. Отрицательная стимулированная реакция требует подтверждения методом DHR и специализированного иммунологического обследования. Метод особенно важен при рецидивирующих бактериальных и грибковых инфекциях неясной природы. Следовательно, правильный ответ связан с оценкой фагоцитарной функции, главным образом способности нейтрофилов осуществлять кислородзависимое внутриклеточное уничтожение.