2) фиксированные на эритроцитах антитела (+)
3) моноклональные антитела
4) антитела против системы резус
Прямая проба Кумбса, или прямой антиглобулиновый тест, выявляет иммуноглобулины и/или компоненты комплемента, уже фиксированные на поверхности эритроцитов пациента in vivo. После отмывания эритроцитов к ним добавляют антиглобулиновый реагент, содержащий антитела к человеческому IgG и нередко к компоненту комплемента C3. Если эритроциты сенсибилизированы, реагент связывает расположенные на них молекулы и вызывает видимую агглютинацию.
Положительный результат свидетельствует об иммунном повреждении эритроцитов, однако сам по себе не подтверждает наличие клинически значимого гемолиза. Тест применяют при диагностике аутоиммунной гемолитической анемии, гемолитической болезни плода и новорождённого, посттрансфузионных реакций и лекарственно-индуцированного иммунного гемолиза. Специфичность фиксированных иммунных компонентов уточняют с помощью моноспецифических реагентов к IgG и C3d, а выраженность гемолиза оценивают по концентрации гемоглобина, ретикулоцитозу, непрямому билирубину, лактатдегидрогеназе и гаптоглобину.
| Критерий | Прямая проба Кумбса | Непрямая проба Кумбса |
|---|---|---|
| Исследуемый материал | Эритроциты пациента | Сыворотка или плазма пациента |
| Выявляемый объект | IgG и/или C3, фиксированные на эритроцитах | Свободные антиэритроцитарные антитела в крови |
| Место сенсибилизации эритроцитов | В организме пациента | В лабораторных условиях |
| Основной принцип | Агглютинация отмытых сенсибилизированных эритроцитов после добавления антиглобулинового реагента | Инкубация сыворотки с тест-эритроцитами с последующим добавлением антиглобулинового реагента |
| Типичные показания | Иммунный гемолиз, трансфузионная реакция, гемолитическая болезнь новорождённого | Скрининг и идентификация нерегулярных антител, пробы на совместимость |
| Интерпретация положительного результата | Эритроциты покрыты иммуноглобулином или комплементом | В сыворотке присутствуют антитела, способные связываться с антигенами эритроцитов |
Прямая проба Кумбса не ограничивается выявлением антител против антигенов системы Rh, поскольку положительная реакция возможна при участии антител к различным эритроцитарным антигенам. Моноклональные антитела могут входить в состав диагностических реагентов, но не являются самостоятельным объектом исследования. Результат необходимо сопоставлять с клинической картиной и лабораторными признаками разрушения эритроцитов. Отрицательная проба также не полностью исключает иммунный гемолиз при низкой плотности антител или наличии иммуноглобулинов классов, не распознаваемых стандартным реагентом.