2) 30 секунд
3) 30 минут
4) 10 минут
При определении группы крови на плоскости используют прямую реакцию агглютинации: эритроциты новорождённого смешивают с цоликлонами анти-A и анти-B, содержащими специфические моноклональные антитела. При наличии на мембране эритроцитов соответствующего антигена формируется комплекс антиген–антитело , эритроциты объединяются в видимые конгломераты — агглютинаты. Покачивание пластинки улучшает контакт реагента с клетками и обеспечивает равномерное перемешивание.
Результат учитывают через 3 минуты после смешивания. Этот интервал стандартизирует исследование и позволяет выявить макроскопически заметную агглютинацию, включая относительно слабые реакции. Оценка через 30 секунд может привести к недоучёту слабоположительной реакции, а чрезмерное ожидание повышает риск высыхания капли, появления неспецифических изменений и ложной интерпретации.
У новорождённых применяется преимущественно прямая типизация эритроцитов, поскольку собственные изоагглютинины в плазме ещё недостаточно сформированы, поэтому обратное определение группы по сыворотке имеет ограниченную информативность. Агглютинацию оценивают отдельно в каждой капле: наличие зернистости или хлопьевидных скоплений считают положительной реакцией, однородную суспензию без видимых изменений — отрицательной.
| Реакция с анти-A | Реакция с анти-B | Группа крови ABO | Интерпретация |
|---|---|---|---|
| Агглютинация (+) | Нет агглютинации (−) | A (II) | На эритроцитах присутствует антиген A |
| Нет агглютинации (−) | Агглютинация (+) | B (III) | На эритроцитах присутствует антиген B |
| Агглютинация (+) | Агглютинация (+) | AB (IV) | На эритроцитах присутствуют антигены A и B |
| Нет агглютинации (−) | Нет агглютинации (−) | O (I) | Антигены A и B на эритроцитах не выявляются |
| Контрольная проба без специфического реагента | Агглютинации быть не должно; её наличие ставит под сомнение достоверность исследования | ||
| Слабая, неоднородная или противоречивая реакция | Исследование повторяют с новой пробой и при необходимости подтверждают пробирочным или гелевым методом | ||
Срок учёта в 3 минуты относится именно к стандартизированной плоскостной методике с цоликлонами и не должен произвольно заменяться временем, принятым для другой технологии. При сомнительном результате учитывают качество образца, срок годности и условия хранения реагентов, наличие гемолиза или сгустков. Окончательное заключение у новорождённого оформляют после сопоставления реакций с анти-A и анти-B, а также с результатами определения резус-принадлежности и подтверждающих исследований при необходимости.