2) выявления нарушения созревания дендритных клеток
3) мониторинга минимальной остаточной болезни
4) исключения острого лейкоза (+)
При приобретённой апластической анемии костный мозг обычно резко гипоцеллюлярен, с жировым замещением и выраженным снижением количества кроветворных клеток. Панцитопения в периферической крови и отсутствие достаточной клеточности пунктата могут имитировать гипопластический вариант острого лейкоза или миелодиспластического синдрома, поэтому важна комплексная оценка костного мозга, включающая проточную цитометрию.
Иммунофенотипирование позволяет выявить или исключить патологическую популяцию бластных клеток. Оценивают экспрессию CD34, CD117, HLA-DR, TdT, миелоидных и В- или Т-клеточных антигенов, а также их сочетание и интенсивность экспрессии. Для острого лейкоза характерно обнаружение клональной популяции бластов с аберрантным иммунофенотипом; при апластической анемии такой популяции не выявляют. С учётом малой клеточности материала результат сопоставляют с морфологией, цитогенетическим и молекулярно-генетическим исследованиями.
Определение минимальной остаточной болезни применяется у пациентов с уже установленным острым лейкозом для оценки ответа на лечение и раннего выявления рецидива, но не является основной целью исследования при первичной диагностике апластической анемии. Нарушения созревания моноцитов или дендритных клеток не относятся к ведущим диагностическим задачам при этом заболевании. Таким образом, ключевое значение проточной цитометрии заключается в дифференциальной диагностике гипопластической аплазии и острого лейкоза.
| Признак | Приобретённая апластическая анемия | Острый лейкоз | Миелодиспластический синдром |
|---|---|---|---|
| Клеточность костного мозга | Резко снижена, часто с жировым замещением | Обычно повышена или неравномерно изменена; возможен гипопластический вариант | Нормальная, повышенная или сниженная |
| Бластные клетки | Не увеличены, патологическая бластная популяция отсутствует | Выявляется избыток бластов; диагностически значимы морфологические и генетические критерии | Бласты могут быть увеличены, но обычно не достигают критериев острого лейкоза |
| Иммунофенотипирование | Нет аберрантного клона бластов; клеточность образца может быть недостаточной | Определяется клональная популяция с характерным или аберрантным сочетанием антигенов | Возможны аномалии созревания и аберрантная экспрессия антигенов |
| Морфологическая картина | Гипоцеллюлярность без инфильтрации опухолевыми клетками | Инфильтрация бластами различной степени выраженности | Дисплазия одного или нескольких ростков кроветворения |
| Цитогенетические и молекулярные изменения | Чаще отсутствуют специфические лейкозные аномалии | Могут выявляться лейкоз-ассоциированные хромосомные и молекулярные изменения | Возможны клональные цитогенетические изменения, поддерживающие диагноз |
| Дополнительный дифференциальный признак | Возможны небольшие ПНГ-клоны, выявляемые методом FLAER и по дефициту CD55/CD59 | ПНГ-клон не объясняет наличие бластной популяции и не заменяет диагностику лейкоза | Клональность и дисплазия оцениваются совместно с морфологией и генетическими данными |
Отсутствие патологической бластной популяции при выраженной гипоцеллюлярности поддерживает диагноз апластической анемии, но само по себе не заменяет морфологическое исследование и оценку хромосомных аномалий. Особенно важна правильная интерпретация отрицательного результата при малом объёме или низкой клеточности образца. Обнаружение аберрантных бластов требует углублённой верификации варианта острого лейкоза с использованием морфологических, цитогенетических и молекулярных методов.