2) исключения острого лейкоза
3) мониторинга минимальной остаточной болезни
4) определения группы крови
Иммунофенотипирование периферической крови при приобретённой апластической анемии проводят прежде всего для выявления клона пароксизмальной ночной гемоглобинурии (ПНГ). В основе его формирования лежит приобретённая мутация гена PIGA в гемопоэтической стволовой клетке, вследствие чего нарушается синтез гликозилфосфатидилинозитольного (GPI) якоря. Клетки такого клона не экспрессируют связанные с GPI белки, включая CD55 и CD59, и становятся более уязвимыми для комплемент-опосредованного разрушения.
Клон выявляют методом высокочувствительной проточной цитометрии, обычно исследуя гранулоциты и моноциты с использованием FLAER и GPI-связанных маркеров; эритроциты дополнительно оценивают по экспрессии CD59. Приобретённая апластическая анемия и ПНГ имеют общую иммунопатогенетическую связь, поэтому даже небольшой ПНГ-клон может обнаруживаться до появления выраженного внутрисосудистого гемолиза. Такой результат имеет диагностическое и прогностическое значение, помогает оценить риск гемолитических проявлений и тромбозов, а также уточнить дальнейшую тактику наблюдения и лечения.
| Исследуемый аспект | Метод или признаки | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Гранулоциты | FLAER, CD24 и другие GPI-связанные маркеры | Наиболее информативная популяция для количественной оценки ПНГ-клона |
| Моноциты | FLAER, CD14 и дополнительные GPI-связанные антигены | Подтверждают наличие клеток с дефицитом GPI-якоря |
| Эритроциты | Снижение или отсутствие CD59 | Отражает эритроцитарную составляющую клона, но может недооценивать его размер при гемолизе или после трансфузий |
| Положительный результат | Выявление популяции клеток с отсутствием FLAER и/или GPI-связанных антигенов | Свидетельствует о ПНГ-клоне; клиническая значимость зависит от его размера и признаков гемолиза |
| Морфологическое исследование крови и костного мозга | Оценка бластов, дисплазии и клеточности костного мозга | Используется для диагностики аплазии и исключения острого лейкоза, но не является основной целью поиска ПНГ-клона |
| Мониторинг минимальной остаточной болезни | Определение опухолево-ассоциированного иммунного фенотипа после лечения лейкоза | Применяется при острых лейкозах и не характеризует ПНГ-клон при апластической анемии |
| Группа крови | Иммуногематологическое типирование эритроцитов по системам ABO и Rh | Не относится к задачам иммунофенотипирования при апластической анемии |
Наличие ПНГ-клона не всегда означает развернутую классическую ПНГ: возможен субклинический вариант без выраженного гемолиза. Интерпретация результата должна включать оценку лактатдегидрогеназы, билирубина, ретикулоцитов, гаптоглобина и клинических признаков тромбоза или гемоглобинурии. Отрицательный результат не исключает последующего появления клона, поэтому при сохраняющейся аплазии или появлении признаков гемолиза исследование может потребовать повторения.