2) более 20% бластных клеток в костном мозге
3) цитоплазматических и мембранных лимфоидных антигенов с помощью проточной цитометрии (+)
4) положительной реакции на миелопероксидазу
Лабораторная диагностика острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ) требует подтверждения незрелой лимфоидной природы бластных клеток. Основным методом является многоцветная проточная цитометрия, которая выявляет сочетание цитоплазматических и мембранных антигенов, характерных для В- или Т-линейного лимфопоэза, а также маркеры незрелости, прежде всего TdT и CD34. Для В-клеточного ОЛЛ типичны CD19, CD79a, CD22, PAX5, часто CD10; для Т-клеточного — цитоплазматический или поверхностный CD3, CD7, CD2 и CD5.
Иммунофенотипирование не только подтверждает лимфоидную принадлежность опухолевого клона, но и позволяет провести дифференциальную диагностику между ОЛЛ и острым миелоидным лейкозом, определить В- или Т-линейный вариант и выявить аберрантный фенотип для последующего мониторинга минимальной остаточной болезни. Морфологическое обнаружение более 20% бластных клеток в костном мозге является важным количественным критерием острого лейкоза, однако само по себе не устанавливает его лимфоидную природу.
Миелопероксидаза и липидные цитохимические реакции преимущественно характеризуют миелоидную дифференцировку и обычно отрицательны при ОЛЛ. Отрицательный результат по этим признакам поддерживает лимфоидный вариант, но решающее значение имеет не отдельная реакция, а комплексный профиль экспрессии антигенов, определяемый проточной цитометрией.
| Диагностический признак | Значение при ОЛЛ | Практическое значение |
|---|---|---|
| Бластные клетки в костном мозге ≥20% | Подтверждает острый характер лейкемического процесса | Не определяет клеточную линию; необходима иммунологическая верификация |
| В-линейные антигены: CD19, CD79a, CD22, PAX5, часто CD10 | Характерны для В-ОЛЛ | Позволяют подтвердить В-клеточную дифференцировку и сформировать иммунный профиль клона |
| Т-линейные антигены: цитоплазматический или поверхностный CD3, CD7, CD2, CD5 | Характерны для Т-ОЛЛ | Цитоплазматический CD3 является наиболее специфичным признаком Т-клеточной линии |
| Маркеры незрелости: TdT, CD34 | Часто выявляются в лимфобластах | Подтверждают незрелый характер клеток, но не заменяют определение В- или Т-линии |
| Миелопероксидаза и Sudan Black B | Как правило, отрицательны при ОЛЛ | Положительная реакция больше соответствует миелоидной дифференцировке и ОМЛ |
| Цитогенетические и молекулярные изменения | Могут выявлять, например, гипердиплоидию, транслокацию ETV6::RUNX1 или перестройку BCR::ABL1 | Уточняют вариант заболевания, прогноз и выбор таргетной терапии |
| Аберрантный иммунный фенотип | Индивидуален для опухолевого клона | Используется для оценки минимальной остаточной болезни в динамике лечения |
Таким образом, выявление цитоплазматических и мембранных лимфоидных антигенов методом проточной цитометрии является ключевым этапом подтверждения ОЛЛ. Диагноз устанавливают комплексно: с учетом количества бластов, морфологии, иммунophenотипа и, при необходимости, генетических изменений. Иммунофенотипирование особенно важно при неубедительной морфологической картине и при разграничении ОЛЛ с острым миелоидным лейкозом. Полученный профиль также имеет прогностическое значение и используется для контроля ответа на терапию.