2) иммунофенотипирование обладает большей чувствительностью (+)
3) цитологическое исследование менее субъективно
4) для данных видов исследования используются разные образцы СМЖ
При остром лейкозе поражение центральной нервной системы может сопровождаться присутствием в цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) небольшого количества бластных клеток. Цитологическое исследование основано на оценке клеточной морфологии в цитоспиновом препарате, поэтому его результат зависит от числа сохранившихся клеток, качества приготовления препарата и опыта специалиста. При низкой клеточности ЦСЖ, быстрой дегенерации бластов и малом объёме исследуемого материала опухолевые клетки могут не попасть в препарат или быть неотличимыми от реактивных лимфоцитов.
Проточная цитометрия выявляет клетки по комплексу мембранных и цитоплазматических антигенов, характерных для лейкозного клона. Метод позволяет анализировать большое число клеток и обнаруживать небольшую популяцию бластов даже при отсутствии выраженных морфологических признаков; чувствительность может достигать уровня, сопоставимого с исследованием минимальной остаточной болезни, при достаточном объёме и правильной транспортировке образца. Поэтому иммунофенотипирование обладает большей аналитической чувствительностью, хотя его результаты необходимо интерпретировать с учётом клинических данных, клеточного состава ЦСЖ и иммунопрофиля первичной опухоли.
Цитология и проточная цитометрия не являются взаимоисключающими методами. Цитологическое исследование сохраняет значение для оценки морфологии и традиционной классификации CNS-статуса, тогда как проточная цитометрия повышает вероятность выявления малочисленного лейкозного клона. Наиболее информативно их сочетание при исследовании свежей ЦСЖ, поскольку задержка обработки приводит к лизису клеток и снижению диагностической эффективности обоих подходов, особенно проточной цитометрии.
| Критерий | Цитологическое исследование | Проточная цитометрия |
|---|---|---|
| Принцип метода | Морфологическая оценка клеток в цитоспиновом препарате | Определение экспрессии антигенов на отдельных клетках с помощью панели моноклональных антител |
| Выявляемый признак | Размер, форма ядра, структура хроматина, наличие ядрышек и цитоплазмы | Лейкозный иммунный фенотип, включая сочетание линейных и аберрантных антигенов |
| Чувствительность при низкой клеточности ЦСЖ | Ограничена: малое число клеток может не попасть в препарат или быть недооценено | Выше: анализируется значительное число клеток и выявляются малые патологические популяции |
| Основные источники ложноотрицательного результата | Дегенерация бластов, недостаточный клеточный осадок, сходство с реактивными лимфоцитами | Малый объём образца, задержка доставки, лизис клеток, неполная или неподходящая панель антител |
| Специфичность | Зависит от сохранности морфологии и квалификации специалиста | Высока при подтверждении совпадения с иммунным профилем лейкоза, но требует корректной интерпретации |
| CNS1 | Бласты в ЦСЖ не обнаружены | Патологическая популяция не выявлена |
| CNS2 | Бласты обнаружены при количестве лейкоцитов менее 5/мкл | Может выявить лейкозные клетки даже при минимальной опухолевой нагрузке |
| CNS3 | Бласты при количестве лейкоцитов не менее 5/мкл либо клинические признаки поражения ЦНС | Подтверждает наличие и фенотип опухолевой популяции, но не заменяет клинико-цитологическую оценку |
Таким образом, преимущество проточной цитометрии связано прежде всего с высокой чувствительностью иммунофенотипического выявления малочисленных бластов, а не с использованием другого вида ЦСЖ. Для повышения диагностической точности материал следует получать до интратекального введения препаратов и быстро направлять в лабораторию. Отрицательный результат проточной цитометрии не исключает поражения ЦНС при недостаточном качестве образца или несоответствующей панели антител. Окончательное заключение формируют на основании совокупности цитологии, проточной цитометрии, клинической картины и данных общего анализа ЦСЖ.