2) флотации
3) седиментации (+)
4) агрегации
Концентраторы типа ParaSep применяют для обогащения проб кала методом формалин-эфирной (или формалин-этилацетатной) концентрации с последующим центрифугированием. После эмульгирования и фильтрации образца крупные примеси задерживаются, органический растворитель удаляет значительную часть жировых компонентов, а яйца гельминтов, цисты и ооцисты простейших концентрируются в осадке под действием силы тяжести и центробежной силы. Именно накопление диагностически значимых паразитарных элементов в донном слое определяет седиментационный принцип метода.
Метод повышает вероятность обнаружения возбудителя по сравнению с исследованием нативного мазка, особенно при низкой интенсивности инвазии. В отличие от флотации, паразитарные элементы не всплывают в растворе с высокой относительной плотностью, а оседают вместе с наиболее плотными компонентами образца. Агглютинация и агрегация не являются основой работы ParaSep: они относятся к процессам склеивания частиц или клеточных элементов и не обеспечивают специфического концентрирования яиц и цист в данной системе.
| Подход | Физический принцип | Расположение паразитарных элементов | Диагностические особенности |
|---|---|---|---|
| ParaSep | Седиментация, усиленная центрифугированием, после обработки формалином и органическим растворителем | В донном осадке пробирки | Позволяет исследовать концентрат на яйца гельминтов, цисты и ооцисты простейших |
| Флотация | Всплывание элементов в растворе с большей плотностью, чем у яиц или цист | В поверхностной плёнке или верхнем слое раствора | Хорошо выявляет многие лёгкие яйца и цисты, но может быть менее эффективна для тяжёлых яиц |
| Нативный мазок | Прямое микроскопическое исследование небольшого количества материала | Распределены в препарате без предварительного обогащения | Прост и быстр, но имеет меньшую чувствительность при слабой инвазии |
| Агглютинация | Специфическое или неспецифическое склеивание частиц, например в иммунологических реакциях | Формирование видимых агрегатов в реакционной смеси | Не является механизмом концентрации паразитарных элементов в ParaSep |
| Агрегация | Объединение частиц в скопления под влиянием физических или химических факторов | Скопления частиц в исследуемой среде | Не обеспечивает направленного отделения яиц, цист и ооцист от фекального детрита |
| Молекулярные и антигенные методы | Выявление ДНК, РНК или специфических антигенов возбудителя | Не имеют стадии механического осаждения паразитов | Могут дополнять микроскопию при малой паразитарной нагрузке или необходимости видовой идентификации |
Результат седиментационного концентрирования оценивают микроскопически после приготовления препарата из осадка. Отрицательный результат не исключает паразитоз при однократном исследовании, поэтому при сохраняющемся клиническом подозрении анализ кала выполняют серийно. Для отдельных инфекций, включая криптоспоридиоз и некоторые тканевые паразитозы, требуются специальные окраски, иммунохимические или молекулярные тесты. Таким образом, ParaSep является методом предварительного обогащения материала, основанным на осаждении паразитарных элементов.