2) sudan III-IV
3) van Gieson
4) congo rot
Окраска по Ли, или ГОФП-метод — гематоксилин–основной фуксин–пикриновая кислота, — применяется для выявления ранних ишемических и контрактурных повреждений кардиомиоцитов. Повреждённые участки миокарда приобретают выраженную фуксинофилию и окрашиваются в красный или малиновый цвет, тогда как относительно сохранённые мышечные волокна имеют желтовато-зелёную либо желтовато-коричневую окраску. На этом фоне хорошо визуализируются сегментарные и субсегментарные контрактуры, а также полосы пересокращения миофибрилл.
Контрактурное повреждение развивается вследствие энергетического дефицита и перегрузки кардиомиоцита ионами кальция, вызывающих патологическое укорочение саркомеров и стойкое пересокращение миофибрилл. При нарастании повреждения возникают чередование зон гиперконтракции и перерастяжения, фрагментация миофибрилл и контрактурный некроз. Такие изменения особенно характерны для ишемии с последующей реперфузией, гиперкатехоламинемии, тяжёлых тахиаритмий и некоторых вариантов острого повреждения миокарда.
| Метод окраски | Основной выявляемый компонент или изменение | Диагностическая картина | Значение для исследования миокарда |
|---|---|---|---|
| По Ли, ГОФП | Раннее ишемическое и контрактурное повреждение кардиомиоцитов | Повреждённые волокна и полосы пересокращения красные или малиновые; сохранённый миокард желтовато-зелёный | Наиболее соответствует задаче выявления контрактур и ранней фуксинофилии кардиомиоцитов |
| Гематоксилин и эозин | Общая тканевая структура, ядра, цитоплазма, некроз и воспалительная реакция | Контрактурные полосы интенсивно эозинофильны, возможны волнообразность волокон и утрата ядер | Обязательный обзорный метод, но менее чувствителен к ранним метаболическим изменениям |
| Судан III–IV | Нейтральные липиды | Жировые включения окрашиваются в оранжево-красные оттенки | Используется для диагностики жировой дистрофии, обычно на замороженных срезах |
| По ван Гизону | Коллагеновые волокна и соединительная ткань | Коллаген красный, мышечные элементы жёлтые | Позволяет оценивать кардиосклероз, рубцевание и периваскулярный фиброз |
| Конго красным | Амилоид | Красно-оранжевые отложения с яблочно-зелёным свечением в поляризованном свете | Применяется при подозрении на амилоидную кардиомиопатию, а не для выявления контрактур |
| Железным гематоксилином | Миофибриллярный аппарат и поперечная исчерченность | Контрастное выявление миофибрилл, их фрагментации и структурной дезорганизации | Дополняет оценку характера повреждения сократительного аппарата кардиомиоцитов |
Результат окраски по Ли необходимо оценивать совместно с обзорной микроскопией, локализацией изменений и клинико-анатомическими данными. Фуксинофилия отражает повреждение цитоплазматических белков, но сама по себе не устанавливает причину поражения миокарда. При аутолизе, недостаточной фиксации или технических погрешностях возможны ложноположительные и неравномерные реакции. Поэтому достоверное заключение основывается на сочетании контрактурных полос, мозаичности поражения, признаков некроза и данных о возможной ишемии или реперфузии.