2) реакции на кислую фосфатазу
3) реакции на липиды
4) ШИК (PAS)-реакции (+)
ШИК-реакция выявляет в цитоплазме бластных клеток гликоген и другие полисахариды, которые окисляются периодной кислотой с образованием альдегидных групп и окрашиваются реактивом Шиффа в малиново-красный цвет. Для лимфобластов характерна положительная реакция в виде крупных гранул или глыбчатых включений, нередко расположенных по периферии цитоплазмы. Такой тип окрашивания исторически использовали как важный цитохимический признак острого лимфобластного лейкоза.
Цитохимический профиль помогает отличить лимфобластный вариант от острых миелоидных лейкозов. Миелобласты обычно дают положительную реакцию на миелопероксидазу и липиды, тогда как лимфобласты, как правило, миелопероксидазонегативны и могут демонстрировать выраженную PAS-позитивность. Реакция на кислую фосфатазу менее специфична, хотя локализованная парануклеарная активность может наблюдаться при отдельных вариантах Т-линейного лимфобластного лейкоза.
В современной диагностике ШИК-реакция имеет вспомогательное значение и не является самостоятельным окончательным методом верификации. Линейную принадлежность бластов подтверждают проточной цитометрией или иммуногистохимией с определением TdT, CD34, В-клеточных маркеров CD19, CD79a, PAX5 либо Т-клеточных маркеров цитоплазматического и поверхностного CD3. Диагностический алгоритм также включает цитогенетическое и молекулярно-генетическое исследование, необходимое для классификации заболевания и оценки прогноза.
| Исследование или признак | Острый лимфобластный лейкоз | Дифференциально-диагностическое значение |
|---|---|---|
| ШИК (PAS)-реакция | Часто положительная, гранулярная или глыбчатая окраска цитоплазмы | Поддерживает лимфоидную природу бластов, но не обладает абсолютной специфичностью |
| Миелопероксидаза | Обычно отрицательная | Положительная реакция свидетельствует в пользу миелоидной дифференцировки |
| Реакция на липиды с Суданом чёрным B | Как правило, отрицательная | Позитивность характернее для миелобластов и гранулоцитарного ряда |
| Кислая фосфатаза | Возможна очаговая парануклеарная активность, особенно при Т-линейном варианте | Имеет ограниченную специфичность и используется только как дополнительный признак |
| TdT | Положительна в большинстве В- и Т-лимфобластных лейкозов | Подтверждает незрелый лимфоидный фенотип клеток |
| Линейные иммуномаркеры | CD19, CD79a, PAX5 при В-линии; цитоплазматический или поверхностный CD3 при Т-линии | Обеспечивают достоверное определение направления дифференцировки бластов |
| Генетическое исследование | Выявляет диагностически и прогностически значимые хромосомные и молекулярные изменения | Уточняет современную классификационную категорию и влияет на выбор терапии |
Следовательно, PAS-позитивность является классическим цитохимическим ориентиром, характерным для лимфобластной популяции. Интерпретировать реакцию необходимо совместно с морфологией костного мозга и отсутствием миелоидных цитохимических маркеров. Окончательное заключение формируют на основании иммуннофенотипа и генетических особенностей опухолевого клона. Такой комплексный подход позволяет исключить острый миелоидный лейкоз и неоднозначные лейкозы смешанного фенотипа.