2) Leu-7 и СD56
3) СD56 и CD34
4) Leu-7 и CD31
CD31 и CD34 являются панэндотелиальными иммуногистохимическими маркерами, визуализирующими клетки, выстилающие сосудистые пространства. CD31, или PECAM-1, преимущественно локализуется на мембранах эндотелиоцитов, а CD34 выявляет эндотелий большинства кровеносных сосудов. Окрашивание позволяет подтвердить, что комплекс опухолевых клеток расположен внутри пространства, ограниченного эндотелиальной выстилкой, то есть представляет истинный сосудистый опухолевый эмбол, а не щель между опухолью и стромой.
Главным морфологическим критерием сосудистой инвазии служит наличие опухолевых клеток в просвете сосуда с доказанной эндотелиальной границей; дополнительными признаками могут быть прикрепление эмбола к сосудистой стенке, присутствие эритроцитов или тромботических масс. Совместное применение CD31 и CD34 повышает воспроизводимость оценки и помогает исключить ретракционный артефакт — искусственное образование щелей вокруг опухолевых комплексов при фиксации и проводке материала. При этом результат иммуногистохимии необходимо интерпретировать вместе с окраской гематоксилином и эозином: CD31 может маркировать тромбоциты и отдельные клетки миелоидного ряда, а CD34 — фибробласты и некоторые опухоли.
Leu-7, соответствующий антигену CD57, и CD56 являются преимущественно маркерами NK-клеток, отдельных субпопуляций лимфоцитов и опухолей с нейроэндокринной либо нейральной дифференцировкой. Они не выявляют сосудистую эндотелиальную выстилку и поэтому не позволяют надежно подтвердить расположение эпителиального опухолевого комплекса внутри сосуда.
| Маркер или метод | Выявляемая структура | Значение при оценке сосудистой инвазии | Основные ограничения |
|---|---|---|---|
| Гематоксилин и эозин | Общая архитектоника ткани, опухолевые эмболы, эритроциты, тромбы | Первичная оценка наличия опухолевых клеток в предполагаемом сосудистом просвете | Ретракционные щели могут имитировать сосуды; уплощенный эндотелий нередко плохо различим |
| CD31 | Мембраны эндотелиоцитов кровеносных и большинства лимфатических сосудов | Четко очерчивает эндотелиальную границу вокруг опухолевого эмбола | Может окрашивать тромбоциты, макрофаги и отдельные опухолевые клетки |
| CD34 | Эндотелий преимущественно кровеносных сосудов | Подтверждает сосудистую природу пространства и дополняет CD31 | Экспрессируется фибробластами и рядом мезенхимальных опухолей; неоднородно выявляется в лимфатическом эндотелии |
| ERG | Ядра эндотелиоцитов | Обеспечивает высокий контраст и помогает идентифицировать сплющенные эндотелиальные клетки | Экспрессия возможна в некоторых неэндотелиальных опухолях, включая часть карцином предстательной железы |
| D2-40, подопланин | Лимфатический эндотелий | Позволяет подтвердить лимфатическую инвазию и отличить ее от инвазии кровеносных сосудов | Может окрашивать миоэпителиальные, мезотелиальные и некоторые опухолевые клетки |
| Панцитокератины | Эпителиальные опухолевые клетки | При двойном окрашивании с эндотелиальным маркером облегчают обнаружение малых опухолевых эмболов | Не подтверждают сосудистую природу окружающего пространства без эндотелиального маркера |
| CD56 и Leu-7/CD57 | NK-клетки, отдельные лимфоциты, клетки нейральной или нейроэндокринной дифференцировки | Не применяются для доказательства эндотелиальной выстилки сосуда | Положительная реакция характеризует фенотип клеток, но не подтверждает сосудистую инвазию |
Выявление сосудистой инвазии имеет прогностическое значение, поскольку отражает способность опухоли к гематогенному или лимфогенному распространению и может влиять на стадию заболевания и лечебную тактику. Иммуногистохимическое окрашивание следует назначать прежде всего в морфологически сомнительных участках, а не использовать вместо анализа стандартных срезов. Для разграничения кровеносной и лимфатической инвазии панэндотелиальные маркеры дополняют D2-40 и, при необходимости, окраской эластических волокон сосудистой стенки. Окончательное заключение формулируют только при согласовании иммунного фенотипа с расположением опухолевого эмбола и общей архитектоникой ткани.