2) 103
3) 112
4) 115
В судебно-генетическом исследовании под длиной гена амелогенина обычно понимают размер диагностического ПЦР-ампликона локуса AMELX, а не протяжённость всего гена. Для X-хромосомного варианта размер амплифицируемого фрагмента составляет 106 пар нуклеотидов, поэтому правильным является ответ 1.
Метод основан на одновременной амплификации гомологичных локусов AMELX на X-хромосоме и AMELY на Y-хромосоме. Между ними имеется различие длиной 6 п. н.: фрагмент AMELX имеет размер 106 п. н., тогда как стандартный фрагмент AMELY — 112 п. н. При капиллярном электрофорезе это позволяет выявлять один сигнал 106 п. н. при типичном XX-профиле и два сигнала — 106 и 112 п. н. — при типичном XY-профиле.
Амелогениновый маркер применяется для молекулярно-генетического определения хромосомного пола и как ориентир при интерпретации смешанных или деградированных биологических следов. Однако он не должен рассматриваться как единственный критерий: возможны делеции или мутации участка AMELY, приводящие к ложному женскому профилю у лиц с Y-хромосомой. При спорных результатах используют дополнительные Y-специфические маркеры и STR-профилирование.
| Показатель | AMELX | AMELY | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Хромосомная локализация | X-хромосома, область Xp22.31 | Y-хромосома, область Yp11.2 | Различение X- и Y-содержащих ампликонов |
| Размер стандартного ПЦР-фрагмента | 106 п. н. | 112 п. н. | Разница в 6 п. н. формирует разделяемые пики при электрофорезе |
| Типичный профиль XX | Пик или полоса 106 п. н. | Отсутствует | Соответствует типичному женскому хромосомному профилю |
| Типичный профиль XY | Пик 106 п. н. | Пик 112 п. н. | Соответствует типичному мужскому хромосомному профилю |
| Молекулярная основа различия | Более короткий ампликон | Участок на 6 п. н. длиннее | Размер фрагмента определяется последовательностью между праймерами |
| Основное применение | Предварительное определение хромосомного пола и контроль наличия Y-компонента | Используется в судебно-генетической экспертизе и идентификационных исследованиях | |
| Ограничение метода | Возможна потеря сигнала AMELY при делеции или мутации | Результат подтверждают дополнительными Y-маркерами и другими генетическими системами | |
Таким образом, диагностический фрагмент X-хромосомного амелогенина имеет размер 106 п. н. Его отличие от 112-п. н. фрагмента AMELY лежит в основе стандартной амелогениновой системы. При исследовании следов необходимо учитывать качество ДНК, ингибирование ПЦР и возможные варианты локуса AMELY. Окончательная экспертная интерпретация должна опираться на совокупность молекулярно-генетических маркеров.