2) 112 (+)
3) 115
4) 103
Отмеченное значение 112 пар нуклеотидов соответствует размеру диагностического ПЦР-ампликона Y-хромосомного варианта гена амелогенина — AMELY. Важно учитывать, что речь идет не о полной протяженности гена, а об участке, амплифицируемом стандартной парой праймеров в судебно-генетических исследованиях. Аналогичный фрагмент AMELX имеет длину 106 пар нуклеотидов, поскольку в первом интроне X-хромосомного гомолога присутствует делеция шести нуклеотидов.
После ПЦР продукты разделяют методом капиллярного или гель-электрофореза. При типичном женском кариотипе выявляется только ампликон AMELX, а при типичном мужском кариотипе — фрагменты AMELX и AMELY длиной 106 и 112 пар нуклеотидов соответственно. Разница в шесть нуклеотидов позволяет включать локус амелогенина в мультиплексные тест-системы одновременно с аутосомными STR-маркерами.
Амелогениновый тест используется как ориентировочный молекулярно-генетический маркер половой принадлежности биологического материала. Его результат необходимо оценивать совместно с полным ДНК-профилем, поскольку делеции участка AMELY, мутации в области связывания праймеров и некоторые хромосомные аномалии могут приводить к отсутствию Y-специфического сигнала у лиц мужского пола. При сомнительном результате применяют дополнительные Y-хромосомные маркеры, например SRY, Y-indel или Y-STR-локусы.
| Исследуемый признак | Результат | Судебно-генетическое значение |
|---|---|---|
| Ампликон AMELX | 106 пар нуклеотидов | Обнаруживается у лиц с X-хромосомой независимо от пола |
| Ампликон AMELY | 112 пар нуклеотидов | Указывает на наличие исследуемого участка Y-хромосомы |
| Различие фрагментов | 6 пар нуклеотидов | Обусловлено делецией в первом интроне AMELX |
| Один пик 106 п. н. | Типичный профиль XX | Обычно соответствует биологическому материалу женского происхождения |
| Пики 106 и 112 п. н. | Типичный профиль XY | Обычно соответствует биологическому материалу мужского происхождения |
| Отсутствие пика AMELY у мужчины | Возможная делеция или нарушение амплификации | Требует исследования дополнительных Y-хромосомных локусов |
| Смешанный биологический материал | Соотношение пиков может быть изменено | Интерпретацию проводят совместно с аутосомным STR-профилем |
Таким образом, значение 112 пар нуклеотидов характеризует Y-специфический продукт амплификации локуса амелогенина. Небольшой размер ампликона способствует его выявлению даже в частично деградированной ДНК. Однако локус амелогенина не является самостоятельным безошибочным доказательством генетического пола. Экспертное заключение должно учитывать качество образца, остальные локусы ДНК-профиля и результаты подтверждающих Y-хромосомных тестов.