2) прямую жидкость – жидкостную экстракцию
3) настаивание с этанолом, подкисленным щавелевой кислоты раствором 10%
4) настаивание с водой, подкисленной щавелевой кислоты раствором 10%
Перколяция смесью ацетон–вода в соотношении 3:1 относится к частным методам, поскольку применяется при направленном судебно-химическом исследовании на заранее предполагаемое лекарственное вещество или ограниченную группу соединений. В отличие от общих схем, предназначенных для ненаправленного поиска широкого спектра токсикантов, условия частного метода специально подбирают с учётом полярности, кислотно-основных свойств, устойчивости и связи аналита с компонентами ткани.
При перколяции экстрагент последовательно проходит через слой измельчённого биологического материала, поэтому ткань постоянно контактирует со свежими порциями растворителя и поддерживается высокий градиент концентрации аналита. Ацетон денатурирует и осаждает белки, способствует разрушению тканевой матрицы и высвобождению связанных с ней веществ, а водный компонент обеспечивает извлечение более полярных и частично ионизированных соединений. Такой состав экстрагента позволяет повысить полноту выделения целевых веществ и одновременно уменьшить содержание ряда мешающих биогенных примесей.
| Критерий сравнения | Перколяция ацетон–вода 3:1 | Прямая жидкость–жидкостная экстракция | Настаивание с подкисленным этанолом | Настаивание с подкисленной водой |
|---|---|---|---|---|
| Тип методического подхода | Частный, направленный | Универсальная экстракционная операция | Общий метод изолирования | Общий метод изолирования |
| Основной объект применения | Биологические ткани при поиске заданного аналита | Преимущественно жидкие вытяжки и биологические жидкости | Ткани органов при ненаправленном исследовании | Ткани органов при ненаправленном исследовании |
| Механизм извлечения | Непрерывное прохождение свежего экстрагента через ткань | Распределение вещества между двумя несмешивающимися фазами | Переход веществ и их солей в кислую спиртовую фазу | Переход преимущественно полярных и ионизированных форм в воду |
| Воздействие на белковую матрицу | Выраженная денатурация и осаждение белков ацетоном | Предварительная депротеинизация обычно требуется отдельно | Этанол осаждает значительную часть белков | Белки и другие примеси извлекаются сравнительно полно |
| Селективность | Повышенная за счёт заданного состава экстрагента и режима перколяции | Зависит от pH и коэффициента распределения аналита | Невысокая, рассчитана на широкий круг веществ | Невысокая, возможно значительное соизвлечение примесей |
| Основное преимущество | Эффективное высвобождение целевого вещества из плотной тканевой матрицы | Быстрота и возможность регулирования избирательности изменением pH | Широкий охват веществ основного и нейтрального характера | Доступность растворителя и пригодность для общего скрининга |
Выбор частной схемы должен основываться на сведениях об обстоятельствах дела, предполагаемом препарате и его физико-химических характеристиках. После изолирования полученное извлечение подвергают очистке, концентрированию и скрининговому исследованию. Идентификацию целевого соединения подтверждают независимым высокоселективным методом, например газовой или жидкостной хроматографией с масс-спектрометрическим детектированием. Соблюдение этой последовательности снижает влияние тканевой матрицы и повышает доказательность результатов судебно-химической экспертизы.