2) Браттона ‒ Маршала
3) Драгендорфа
4) Манделина (+)
Реактив Манделина представляет собой раствор метаванадата аммония в концентрированной серной кислоте и относится к окислительным хромогенным реагентам. После опрыскивания тонкослойной хроматограммы он образует с производными фенантренизохинолина окрашенные продукты: пятно морфина обычно приобретает фиолетовый или сине-фиолетовый оттенок, тогда как для кодеина характерна зеленая либо оливково-зеленая окраска. Различие цветовых реакций позволяет дифференцировать вещества после их хроматографического разделения.
Химическая основа дифференциации связана со строением молекул: у морфина в положении C3 имеется свободная фенольная гидроксильная группа, а у кодеина она метилирована с образованием метоксигруппы. Это изменяет скорость и направление окислительно-восстановительных превращений под действием ванадата, вследствие чего формируются продукты разной окраски. Идентификацию проводят по совокупности признаков — положению пятна, значению Rf, цвету и динамике окрашивания по сравнению со стандартными образцами; одна цветная реакция не считается окончательным подтверждением состава.
| Реактив или критерий | Аналитическое назначение | Значение для морфина и кодеина |
|---|---|---|
| Реактив Манделина | Окислительный цветовой проявитель для ряда алкалоидов и наркотических веществ | Обеспечивает различающуюся окраску пятен морфина и кодеина |
| Морфин | Фенантреновый алкалоид со свободной фенольной OH-группой | Обычно образует фиолетовое или сине-фиолетовое окрашивание |
| Кодеин | 3-O-метилированное производное морфина | Характерно зеленое или оливково-зеленое окрашивание реактивом Манделина |
| Реактив Драгендорфа | Общеалкалоидный осадительный и хромогенный реактив | Выявляет широкий спектр азотистых оснований, поэтому обладает недостаточной селективностью для различения двух опиатов |
| Реактив Несслера | Обнаружение аммиака и ионов аммония | Не отражает структурных различий морфина и кодеина |
| Реакция Браттона–Маршалла | Определение первичных ароматических аминов после диазотирования и азосочетания | Применяется преимущественно для соответствующих ароматических аминов и сульфаниламидов, а не для дифференциации опиоидных алкалоидов |
ТСХ с цветовым проявлением относится к скрининговым и ориентировочным методам судебно-химического исследования. Оттенок и интенсивность реакции могут зависеть от количества вещества, состава сорбента, матричных примесей, свежести реактива и времени наблюдения. Поэтому результат сопоставляют с контрольными растворами морфина и кодеина, нанесенными на ту же пластинку. Окончательную идентификацию подтверждают более специфичными инструментальными методами, прежде всего газовой или жидкостной хроматографией с масс-спектрометрическим детектированием.