2) бутанол
3) бензол
4) метанол
При количественном определении этанола методом газожидкостной хроматографии в качестве внутреннего стандарта применяют пропанол, чаще н-пропанол. Его добавляют в известной концентрации к исследуемой пробе и к калибровочным растворам. Пропанол близок к этанолу по летучести, полярности и поведению при пробоподготовке, однако образует самостоятельный хроматографический пик с иным временем удерживания.
Расчёт концентрации этанола проводят по отношению площади или высоты его пика к соответствующему параметру пика внутреннего стандарта. Такой подход компенсирует колебания объёма вводимой пробы, потери летучих веществ, нестабильность пробоподготовки и изменения чувствительности детектора. При корректно подобранных условиях пики этанола и пропанола хорошо разделяются, а сам пропанол обычно отсутствует в биологическом материале в значимых количествах, что обеспечивает специфичность измерения.
| Вещество | Хроматографическая характеристика | Оценка пригодности |
|---|---|---|
| Этанол | Определяемый аналит; характеризуется собственным временем удерживания | Его концентрацию рассчитывают относительно внутреннего стандарта |
| н-Пропанол | Близок к этанолу по физико-химическим свойствам, но имеет отдельный пик | Оптимальный внутренний стандарт для количественного анализа |
| Бутанол | Менее летуч, обычно имеет значительно большее время удерживания | Хуже воспроизводит поведение этанола при парофазном анализе |
| Метанол | Летучий спирт, который может присутствовать при отравлениях или как примесь | Неудобен как стандарт, поскольку сам является клинически значимым аналитом |
| Бензол | Неполярное ароматическое соединение с иными сорбционными свойствами | Химически недостаточно сходен с этанолом и токсичен |
| Критерий разделения | Пики аналита и стандарта не должны перекрываться | Обеспечивает правильную идентификацию и интегрирование сигналов |
| Критерий количественной оценки | Используется отношение площадей пиков этанола и пропанола | Повышает точность и воспроизводимость результата |
В судебно-химическом исследовании внутренний стандарт должен быть химически близок к определяемому соединению, стабилен и отсутствовать в исследуемом объекте. н-Пропанол соответствует этим требованиям и позволяет контролировать аналитические потери на всех этапах исследования. Достоверность результата дополнительно обеспечивают калибровка прибора, анализ контрольных образцов и подтверждение удовлетворительного разделения хроматографических пиков.