2) спектрофотометрия
3) тонкослойная хроматография
4) газожидкостная хроматография (+)
Газожидкостная хроматография (ГЖХ) традиционно является одним из основных методов идентификации лекарственных токсикантов в биологических материалах. Метод основан на разделении компонентов исследуемой пробы между газовой подвижной фазой и жидкой неподвижной фазой колонки. Каждое вещество характеризуется определённым временем удерживания, а сопоставление этого показателя с эталонным стандартом позволяет идентифицировать препарат; площадь хроматографического пика используют для его количественной оценки.
Для анализа исследуют кровь, мочу, содержимое желудка, промывные воды и остатки лекарственного средства. Перед введением пробы выполняют экстракцию и очистку биологического материала, а для некоторых нелетучих или термолабильных соединений — химическую модификацию (дериватизацию), повышающую их летучесть и устойчивость. Высокая чувствительность, возможность одновременного определения нескольких веществ и объективная регистрация результатов делают ГЖХ особенно ценной при подозрении на смешанное или неизвестное лекарственное отравление.
Остальные методы имеют более узкую область применения или чаще используются как ориентировочные. Атомно-абсорбционная спектрометрия предназначена преимущественно для определения металлов, спектрофотометрия недостаточно специфична при наличии нескольких лекарственных веществ, а тонкослойная хроматография удобна для предварительного скрининга, но уступает ГЖХ по чувствительности и воспроизводимости. В современных лабораториях идентификацию нередко подтверждают сочетанием газовой хроматографии с масс-спектрометрией, однако в классической токсикологической диагностике базовым хроматографическим методом остаётся ГЖХ.
| Метод | Основной принцип | Диагностическое значение при лекарственных отравлениях | Ограничения |
|---|---|---|---|
| Газожидкостная хроматография | Разделение веществ по летучести и сродству к неподвижной фазе; идентификация по времени удерживания | Высокая чувствительность, возможность одновременного выявления и количественной оценки нескольких токсикантов | Непригодна для многих нелетучих и термолабильных соединений без предварительной дериватизации |
| Газовая хроматография — масс-спектрометрия | Хроматографическое разделение с последующей регистрацией масс-спектра | Высокая специфичность подтверждения вещества, особенно при сложных и смешанных отравлениях | Более дорогостоящее оборудование и сложная интерпретация результатов |
| Тонкослойная хроматография | Перемещение веществ по сорбенту с различной скоростью и визуализация зон | Быстрый предварительный скрининг лекарственных соединений | Меньшая чувствительность, возможны совпадения по величине коэффициента удерживания |
| Спектрофотометрия | Измерение поглощения света веществом на определённой длине волны | Количественное определение отдельных препаратов и окрашенных продуктов реакций | Низкая специфичность при совместном присутствии нескольких веществ и метаболитов |
| Атомно-абсорбционная спектрометрия | Измерение поглощения света свободными атомами элемента | Определение свинца, ртути, мышьяка и других металлов | Не является универсальным методом идентификации органических лекарственных веществ |
| Высокоэффективная жидкостная хроматография | Разделение соединений в жидкой подвижной фазе под высоким давлением | Особенно полезна для нелетучих, полярных и термолабильных лекарственных средств | В классической схеме тестирования рассматривается как альтернативный, а не основной метод ГЖХ |
Лабораторное заключение необходимо сопоставлять с клиническими проявлениями, временем приёма препарата и концентрацией вещества в крови. Отрицательный результат не исключает отравление при позднем взятии материала, быстром метаболизме или недостаточной чувствительности метода. При тяжёлом состоянии ребёнка токсикологическая диагностика проводится параллельно с поддержанием дыхания и кровообращения, коррекцией гипогликемии и другими неотложными мероприятиями.