2) с 10% желатином
3) на плоскости при комнатной температуре (+)
4) в непрямой пробе Кумбса
Полные групповые агглютинины — это преимущественно антитела класса IgM, способные непосредственно связывать эритроциты и вызывать видимую агглютинацию в физиологическом растворе без дополнительных усилителей реакции. При смешивании сыворотки реципиента с эритроцитами донора на плоскости при комнатной температуре такие антитела быстро образуют агглютинаты. К ним относятся антитела системы ABO, а также некоторые антитела систем MNSs и Lewis, чаще имеющие холодовую реактивность.
Поэтому правильным является исследование на плоскости при комнатной температуре: оно выявляет непосредственную агглютинацию, обусловленную взаимодействием полных антител с антигенами эритроцитов донора. Полиглюкин и желатин применяют главным образом для усиления реакции неполных антител, преимущественно IgG, которые самостоятельно не обеспечивают достаточного сближения эритроцитов. Непрямая проба Кумбса предназначена для обнаружения сенсибилизации эритроцитов IgG-антителами и не является основным методом выявления полных холодовых агглютининов.
| Метод исследования | Основные условия | Преимущественно выявляемые антитела | Механизм и диагностический признак |
|---|---|---|---|
| Проба на плоскости | Сыворотка и эритроциты, комнатная температура | Полные IgM-антитела систем ABO, MNSs, Lewis | Быстрая видимая агглютинация без добавления усиливающей среды |
| Солевой метод в пробирке | Физиологический раствор, обычно комнатная температура | Полные, преимущественно холодовые антитела | Прямое образование клеточных агрегатов; реакция зависит от температуры и времени контакта |
| 33% полиглюкин | Коллоидная усиливающая среда | Некоторые неполные антитела, главным образом анти-Rh | Снижает межэритроцитарное отталкивание и усиливает агглютинацию сенсибилизированных клеток |
| 10% желатин | Желатиновая усиливающая среда, обычно с инкубацией | Неполные IgG-антитела | Повышает вероятность контакта и агглютинации эритроцитов, покрытых антителами |
| Непрямая проба Кумбса | Инкубация сыворотки с эритроцитами, отмывание, добавление антиглобулинового реагента | Неполные IgG-антитела, включая клинически значимые антиэритроцитарные антитела | Антиглобулиновая сыворотка связывает IgG на эритроцитах и вызывает их агглютинацию |
| Оценка совместимости | Сыворотка реципиента и эритроциты конкретного донора | Антитела, способные реагировать с антигенами донорских эритроцитов | Положительная агглютинация указывает на потенциальную иммунологическую несовместимость |
Отсутствие агглютинации в одной методике не исключает антител, выявляемых при другой температуре или с применением антиглобулинового реагента. При индивидуальном подборе крови оценивают как немедленную реакцию полных антител, так и возможную сенсибилизацию эритроцитов неполными антителами. Клинически значимая совместимость должна подтверждаться комплексом иммуногематологических исследований, включая определение ABO и RhD, скрининг антител и пробу на индивидуальную совместимость.