2) живого донора (+)
3) свиньи
4) человекообразной обезьяны
Гемопоэтические стволовые клетки периферической крови получают у живого донора методом аппаратного лейкафереза. В норме их содержание в циркулирующей крови невелико, поэтому перед процедурой проводят мобилизацию — обычно вводят гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (Г-КСФ), который стимулирует выход CD34+-клеток из костного мозга в кровоток. При недостаточном ответе возможно добавление плериксафора, блокирующего взаимодействие CXCR4–CXCL12.
После мобилизации выполняют несколько сеансов цит coletaции на сепараторе клеток крови; эритроциты и большая часть плазмы возвращаются донору. Количество собранных CD34+-клеток оценивают методом проточной цитометрии; при аллогенной трансплантации обычно ориентируются на дозу порядка 2–5 × 106 CD34+-клеток на килограмм массы тела реципиента. Такой способ может применяться как у здорового аллогенного донора, так и у самого пациента при заготовке аутологичного трансплантата.
Трупный материал не является стандартным источником периферических гемопоэтических стволовых клеток: после смерти невозможно провести предшествующую мобилизацию и контролируемый аферез, а качество клеточного препарата быстро снижается. Клетки животных, включая свиней и человекообразных обезьян, не используются для рутинной трансплантации человеку из-за иммунологической несовместимости, риска передачи зоонозных инфекций и отсутствия приемлемой клинической безопасности.
| Источник клеток | Кому выполняют забор | Основной метод получения | Ключевая особенность |
|---|---|---|---|
| Периферическая кровь после мобилизации | Живой аллогенный донор или пациент | Г-КСФ ± плериксафор, затем лейкаферез | Наиболее распространённый источник; не требует пункции костей |
| Костный мозг | Живой донор или пациент | Множественная аспирация из подвздошных костей под анестезией | Клетки получают непосредственно из костномозгового компартмента |
| Пуповинная кровь | Новорождённый после родоразрешения; забор проводится из плаценты и пуповины | Сбор крови после рождения ребёнка | Не требует мобилизации, но объём клеточного препарата ограничен |
| Немобилизованная периферическая кровь | Живой донор или пациент | Лейкаферез без предварительной стимуляции | Содержание CD34+-клеток обычно недостаточно для стандартной трансплантации |
| Контроль клеточного препарата | Донорский или аутологичный материал | Проточная цитометрия с определением CD34+-клеток | Позволяет рассчитать клеточную дозу и подтвердить пригодность трансплантата |
| Безопасность донора | Преимущественно здоровый живой донор | Медицинское обследование, информированное согласие, наблюдение после Г-КСФ и афереза | Возможны кратковременные боли в костях, цитратные реакции и местные осложнения венозного доступа |
Таким образом, принцип забора клеток основан на обратимой мобилизации стволовых клеток из костного мозга в кровоток и их последующем разделении методом афереза. Критерием достаточности заготовки служит не общий объём крови, а количество жизнеспособных CD34+-клеток. Перед трансплантацией препарат подвергают контролю качества, маркировке и проверке инфекционной безопасности.