2) гемагглютинина (HA) и нейраминидазы (NA) (+)
3) неструктурных белков (NS)
4) белков полимеразного комплекса (PB1, PB2, PA)
Подтипирование вируса гриппа A основано на антигенных и генетических свойствах двух поверхностных гликопротеинов — гемагглютинина (HA) и нейраминидазы (NA). Гемагглютинин обеспечивает связывание вирусной частицы с рецепторами клеток дыхательного эпителия и последующее слияние вирусной оболочки с клеточной мембраной. Нейраминидаза расщепляет сиаловые кислоты на поверхности клеток, облегчая высвобождение вновь сформированных вирионов и распространение инфекции.
Комбинация вариантов этих белков обозначается формулой HxNy: например, H1N1 или H3N2. Изменения антигенной структуры HA и NA имеют принципиальное эпидемиологическое значение, поскольку определяют восприимчивость популяции, возможность уклонения от ранее сформированного иммунитета и состав вакцин. Для лабораторной характеристики применяют реакцию торможения гемагглютинации, реакции ингибирования нейраминидазы, ПЦР с subtype-специфичными праймерами и секвенирование генов.
Матриксный белок M и нуклеопротеин NP используются прежде всего для типирования вируса как вируса гриппа A, B или других типов, но не определяют его подтип. Белки полимеразного комплекса и неструктурные белки важны для репликации, регуляции экспрессии генома и вирулентности, однако не применяются как основа общепринятой классификации подтипов. Геном вируса гриппа A сегментирован, поэтому при совместном заражении клеток возможна реассортация сегментов, включая сегменты HA и NA, что способствует появлению новых комбинаций.
| Компонент вируса | Основная функция | Диагностическое или классификационное значение |
|---|---|---|
| Гемагглютинин (HA) | Адгезия к рецепторам с сиаловыми кислотами и слияние мембран | Определяет обозначение H-подтипа; важная мишень нейтрализующих антител |
| Нейраминидаза (NA) | Расщепление сиаловых кислот и высвобождение вирионов | Определяет обозначение N-подтипа; мишень осельтамивира и других ингибиторов нейраминидазы |
| Комбинация HA и NA | Формирует антигенный профиль поверхностных белков | Используется для подтипирования: H1N1, H3N2, H5N1 и другие варианты |
| Нуклеопротеин (NP) | Связывает РНК и участвует в формировании рибонуклеопротеинового комплекса | Совместно с M-белком позволяет установить тип вируса, но не его подтип |
| Матриксный белок (M1/M2) | Поддерживает структуру вириона; M2 участвует в脱оболочке | Маркер типоспецифических исследований и молекулярной диагностики, не основа подтипирования |
| Белки полимеразного комплекса PB1, PB2, PA | Обеспечивают транскрипцию и репликацию вирусной РНК | Характеризуют генетические особенности и адаптацию вируса, но не обозначают подтип H/N |
| Неструктурные белки NS1, NEP/NS2 | Регулируют репликацию, транспорт вирусных компонентов и подавление интерферонового ответа | Могут использоваться для изучения вирулентности, но не являются критерием подтиповой классификации |
Антигенный дрейф HA и NA вследствие точечных мутаций приводит к постепенному изменению сезонных штаммов и необходимости обновления вакцин. Антигенный шифт связан с реассортацией сегментов генома и может вызвать появление вируса с новым сочетанием H и N, к которому у населения отсутствует достаточный иммунитет. Поэтому определение подтипа имеет значение не только для идентификации возбудителя, но и для эпидемиологического надзора, прогноза пандемического риска и выбора противовирусной тактики.